Cold sensitive mutant HotStar Taq DNA Polymerase
- Introduzione
Introduzione
Descrizione del prodotto:
La nostra HotStart mutante sensibile al freddo taq polimerasi del DNA è una variante unica della tradizionale polimerasi Taq, progettata con una mutazione sensibile al freddo che ne impedisce l'attività a temperatura ambiente. Questo design innovativo garantisce che l'enzima rimanga inattivo fino al passo di denaturazione iniziale della PCR, riducendo l'amplificazione non specifica e la formazione di dimeri di primer.
Caratteristiche principali:
- Mutazione sensibile al freddo per un'attivazione controllata
- Nessuna attività a temperatura ambiente, minimizzando l'amplificazione non specifica
- Specificità e resa migliorate del DNA di destinazione
- Adatto per la PCR con abbassamento graduale della temperatura e PCR a gradiente
- Prestazioni migliorate nelle reazioni di PCR multiplex
- Ideale per sistemi automatizzati di gestione dei liquidi
Applicazioni:
- PCR con abbassamento graduale della temperatura e PCR a gradiente
- PCR multiplex per l'amplificazione simultanea di più obiettivi
- Impostazioni PCR automatizzate utilizzando robot per il trattamento dei liquidi
- Test diagnostici che richiedono alta specificità
- Applicazioni di ricerca coinvolgenti template complessi o a bassa concentrazione
- Test forensi e clinici in cui la specificità è fondamentale
Il nostro Cold sensitive mutant HotStart Taq DNA Polymerase offre un vantaggio significativo nelle applicazioni PCR fornendo un avvio pulito al processo di amplificazione. La sua attivazione controllata garantisce risultati più mirati ed efficienti, rendendolo un bene prezioso per i laboratori che cercano di ottimizzare i loro flussi di lavoro PCR.
Descrizione
I polimerasi CSM Taq (Cold sensitive mutant Taq polymerases) sono una forma di polimerasi HotStar. Derivano da mutanti di E. coli. A differenza delle polimerasi Taq hot start basate su anticorpi monoclonali o chimicamente modificate, il Cold Taq è un mutante freddo sensibile del Taq. Mantiene la capacità hot start durante tutto il ciclo di amplificazione.
I polimerasi Taq mutanti sensibili al freddo sono progettate per la PCR Hot Start, non lo sono a bassa temperatura. Offrono un'eccellente specificità e una fedeltà doppia rispetto al Taq selvatico. Sono progettate per la PCR con template difficili come frammenti ricchi di GC e microsatelliti.
Le polimerasi Taq mutanti sensibili al freddo si adattano particolarmente bene all'estensione del primario dei marker di Polimorfismo a Singolo Nucleotide (SNP).
Le polimerasi Taq mutanti sensibili al freddo mantengono un'eccellente specificità e un minimo di sfondo anche in condizioni progettate per un alto rendimento. Infatti, anche sui template genomici, l'enzima può essere utilizzato con concentrazioni di MgCl2+ fino a 10 mM.
Le polimerasi Taq mutanti sensibili al freddo sono in grado di estendersi attraverso regioni difficili, ad esempio regioni che includono ripetizioni invertite tandem e quelle con alta quantità di struttura secondaria.
I polimerasi Taq mutanti sensibili al freddo funzionano in un modo totalmente unico, coinvolgendo una miglior selezione dei nucleotidi nel sito attivo e una velocità di estensione di mismatch molto più bassa, il che significa che solo i primer perfettamente allineati verranno estesi. Di conseguenza, l'enzima può offrire una specificità ancora maggiore rispetto alle tecniche hot-start (manuali o automatiche) senza la necessità di passaggi di pre-incubazione inconvenienti.
Applicazioni
- Amplificazione PCR a partenza calda
- Amplificazione specifica di template cDNA e genomici complessi, per l'amplificazione di template difficili, come frammenti ricchi di GC e microsatelliti
- Estensione dei primer per marcatori SNP
- Amplificazione di target DNA genomici fino a 10 kb con alta fedeltà, specificità e sensibilità
- Amplificazione da template DNA con numero di copie basso, PCR Hot Start ad alto rendimento con alta specificità, sensibilità e resa
- PCR Hot Start diagnostica di routine richiedente alta riproducibilità.
- PCR in Tempo Reale
- PCR Multipla
- Generazione di prodotti PCR per clonazione TA
Controllo della qualità
- assenza funzionale di attività endonucleasi a doppio e a singolo filamento;
- prova di purezza>99% mediante elettroforesi in gel SDS;
- Ogni lotto di CSM Taq DNA Polymerase viene testato per l'amplificazione a partire da quantità pari a 10 ng di DNA genómico umano;
- mantenere la piena attività a temperatura ambiente per una settimana;
- Nessun residuo di DNA dell'ospite.
miscela di reazione impostata
Componente | Volume | concentrazione finale |
Modello | DNA <1 ug | secondo necessità |
primazione anteriore (10 μm) | 2 μl | 0.4 μM |
di base inversa (10 μm) | 5 μl | 1x |
2.5mM di ogni mistura dNTP | 4 μl | 200μM di ciascuno |
CSM Taq DNA polymerase, 5U/μl | 0.4 μl | 2 unità |
Dd 2o al volume finale | 50 μl | non applicabile |
Concentrazione : 5 u/μl
Conservazione : Conservare a -20°C
Imballaggio : sfusi
ordine
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | Mutanti sensibili al freddo della Taq DNA Polymerase, 5U/μl |