Ribonukleáz Inhibitor, RNáz inhibitor 40E µl

recombinant Humán Placenta Ribonuclease Inhibitor, 40U/μl

forrás

E. coli sztema, amely egy rekombináns klónot tartalmaz, amely a humán placenta Ribonuclease Inhibitor génet kifejezi.

Koncentráció

40 E/μl.

Egység definíció

Egy egység azon mennyiség Recombinant Ribonuclease Inhibitor, amely szükséges ahhoz, hogy 5 ng ribonuclease A tevékenységét 50%-ra csökkentse.

A tevékenység a cytidin-2’3’-ciklikus monofoszfát hidrolizisének megakadályozásával méri a ribonuclease A által.

Tárolási búfer

20mM HEPES-KOH (pH 7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50% (k/k) glycerin

Tárolás

Tárolni -20°C-n

Minőségbiztosítás

Endonukleáz hiányzása
1 μg Lambda DNA-t 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral inkubálnak 16 óraig 37°C-ön.
Az inkubáció után a Lambda DNA-t érintetlenül látják az etidium bromid-fényes agároz gélen, hogy megőrizzék az észlelhető Endonukleáz hiányát.

Nickáz hiányzása
1 μg I. típusú szuperkarikált pBR322-t 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral inkubálnak 4 óraig 37°C-ön.
Az inkubáció után a szuperkarikált DNA-t érintetlenül látják az etidium bromid-fényes agároz gélen, hogy megőrizzék az észlelhető nyírást vagy vágást.

Exonukleáz hiányzása
1 μg Lambda DNA/HindIII Jelölőket 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral inkubálnak 16 óraig 37°C-ön.
Az inkubáció után a Lambda DNA/HindIII Jelölőket egy 1%-os agároz gélen választják el és etidium bromiddal festik. A jelölők érintetlen sávok maradnak, anélkül, hogy elterülnek.

RNázés és latens RNázés hiányzása
Az RNáz aktivitás jelenlétének teszteléséhez 1 µg RNA-t inkubálnak 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral 4 óraig 37°C-ben.
Az inkubáció után az RNA-t intakt sávkként látják el egy etidium bromid-festésű agároz gelén, hogy meggyőződjenek a látható RNáz hiányáról.
A rejtett RNáz aktivitás jelenlétének teszteléséhez 200 egység Ribonukleáz Inhibitorral természetesítik hővel 70°C-ben 15 percig, és 1 µg RNA-val inkubálnak 4 óraig 37°C-ben.
Az inkubáció után az RNA-t intakt sávkként látják el egy etidium bromid-festésű agároz gelén, hogy meggyőződjenek a látható RNáz hiányáról.

Fizikai Tisztaság

A tisztaság ≥95%, ahogy az SDS-polyacrilamid gélen Coomassie kék festéssel megbízhatóan mutatja.

Használati Megjegyzés

A Ribonukleáz Inhibitor aktív széles pH tartományban (pH 5,5-9). A szokásos RT és in vitro transkripció Ribonukleáz Inhibitorral végezhető 1 µ/µl végleges koncentrációban.

rendelés