la taq DNS polimeráz, hosszú pcr polimeráz
- bevezető
bevezető
Hosszú PCRtaq DNS polimeráz, 5U/μl
leírás
A taq dna polimeráz háromszor magasabb, mint a taq dna polimeráz
hosszú pcr polimeráz, amely szinergiás módon nagyobb hozamot és hűséget nyújtó hosszú pcr termékeket hoz létre, mint a taq DNA polimeráz önmagában.
A PCR hűsége háromszor magasabb, mint a taq DNA polimeráz esetében.
A la taq-t a nagyon hosszú amplikonok generálására optimalizálták: 40 kb-ig a vírusos DNS-sel és 15 kb-ig a genomikus DNS sablonokkal. A speciálisan kialakított la taq puffer védi a DNS-t a depurinizációtól és a hosszú hőciklusok során történő elnyomástól.
A la taq DNA polimerázsal előállított PCR-termékek többnyire 3'-da-sztályúak, amelyeket ta-vektorban klónozhatnak.
jellemzői
- hosszú pcr termékek
- legfeljebb 40 kb-os, vírusos DNS mint sablon
- legfeljebb 15 kb genom DNS mint sablon
- ideális a 85%-ig magas GC-tartalmú mintákhoz.
- A hűség háromszor magasabb, mint a taq DNS polimeráznál.
- A vegyi anyagok nagy hozamúak.
minőségellenőrzés
A vizsgálatot a 40 kb-os amplikon generációjában lambda-DNA mintával végezték.
koncentráció: 5 u/μl
tárolás
tárolási puffer: az enzim 20 mm tris-hcl (ph 8,0); 0,1 mm edta; 1 mm dtt; 100 mm kcl; stabilizátorok; 50% glicerol formájában kerül forgalomba.
tárolás: -20°C-on.
reakció
A reakció pcr keverék beállított és ajánlott hőciklus feltételek: a folyamodás csak egy példa, amely egy 20kb emberi genom DNS mint a sablon, hogy csak referenciaként, lehet módosítani a hosszúság és a sorrend a sablon és a primer.
komponens | térfogat | végleges koncentráció |
mintázat | DNS < 1 ug | szükség szerint |
Előre indító (10 μm) | 1 μl | 0,2-0,4 μm mindegyik |
fordított alapítószer (10 μm) | 1 μl | 0,2-0,4 μm mindegyik |
10x a taq puffer | 5 μl | 1x |
2,5 mm dntps | 4 μl | 0,2 mm |
a taq DNS polimeráz | 0,05 μl | 2,5 egység |
ddh2o a végleges térfogatig | 50 μl | nem alkalmazható |
94°C 3 perc
94°C 30 másodperc
55°c 30 másodperc 30 ciklus
72°C 1 perc
72°C 5 perc.
rend
pc08 | a taq DNS polimeráz | hosszú pcr taq DNS polimeráz, 5u/μl |