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पीसीआर और आरटी पीसीआर एंजाइम

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यूरेसिल-DNA ग्लाइकोसिलेस (UNG), थर्मोलेबल

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परिचय

यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज, ई.कोलाई, 1U\/μl

विवरण

यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलैबिल एक पुनर्युक्त प्रोटीन है E. coli में, समुद्री बैक्टीरियम से। यह एंजाइम एकल- और दोहरे-स्ट्रैंड डीएनए में U-डीएनए पर यूरेसिल-ग्लाइकोसिडिक बांधनों को हाइड्रोलाइज करता है, यूरेसिल को काटकर डीएनए में क्षार संवेदनशील अबेसिक साइट्स बनाता है। यह एंजाइम RNA और प्राकृतिक, यूरेसिल-मुक्त डीएनए पर निष्क्रिय है। चूंकि यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलैबिल कोई मीटल आयन आवश्यकता नहीं है, इसलिए यह एडीटीए की उपस्थिति में पूरी तरह से सक्रिय है।

यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलेबल, dUTP के साथ उपयोग करके पिछले डीएनए संश्लेषण प्रतिक्रियाओं से PCR "कैरी ओवर" प्रदूषण को दूर करने के लिए उपयोग किया जा सकता है। PCR उत्पादों को विघटन के लिए संवेदनशील बनाने के लिए, PCR प्रतिक्रिया मिश्रण में dTTP को dUTP से बदलना पड़ता है। अगली PCR प्रतिक्रिया मिश्रणों को PCR से पहले यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज (UNG), थर्मोलेबल से पूर्व-इलेक्ट्रीक किया जाना चाहिए ताकि यूरेसिल-युक्त डीएनए को विघटित किया जा सके। स्वाभाविक डीएनए में यूरेसिल नहीं होता है इसलिए नमूना इस प्रक्रिया से विघटित नहीं होता है।

स्रोत: पुनर्जीवित E. coli

केंद्रितता और आकार: 1U/μL

इकाई परिभाषा

एक इकाई को 37°C पर 60 मिनट में 1μg शुद्ध यूरेसिल-युक्त एकक रेखीय DNA को पूरी तरह से विघटित करने वाली यूरेसिल-DNA ग्लाइकोसिलेज़ (UNG) की मात्रा के रूप में परिभाषित किया जाता है।

स्टोरेज बफर

20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(व/आ) Tween-20, 0.5%(व/आ) NP-40, 50%(व/आ) ग्लाइसरॉल।

गुणवत्ता नियंत्रण

पुरीता>99% SDS पेज द्वारा

एंडोन्यूक्लियेस, निकेस, एक्सोन्यूक्लियेस और RNase की कोई प्रदूषण नहीं।

गर्मी से निष्क्रिय

50°C के लिए 2 मिनट

अभिक्रिया तापमान

20~37°C के लिए 10 मिनट।

उपयोग की मात्रा

50ul अभिक्रिया प्रति 0.1~1U UNG एंजाइम।

शिपिंग और स्टोरेज

−20°सी पर रखें, गेल बर्फ के साथ भेजें।

आदेश

UG01 यूरेसिल-N-ग्लाइकोसिलेस (UNG) यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज, ई.कोलाई, 1U\/μl
UG02 यूरेसिल-N-ग्लाइकोसिलेस, थर्मो लेबिल यूरेसिल-डीएनए ग्लाइकोसिलेज, थर्मो लेबिल, 1U\/μl

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