आणविक जीव विज्ञान में m-mlv रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस की भूमिका और अनुप्रयोग
एंजाइमों को आणविक जीव विज्ञान के निरंतर गतिशील क्षेत्र के संबंध में विभिन्न जैव रासायनिक प्रतिक्रियाओं के लिए केंद्रीय भूमिका निभाई गई है।m-mlv रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस(m-mlv rt), जो इन एंजाइमों में से एक है, को हाल ही में बहुत ध्यान दिया गया है क्योंकि यह आरएनए टेम्पलेट्स से सीडीएनए का संश्लेषण करने में सक्षम है। यह एंजाइम जो मोलोनी माउस ल्यूकेमिया वायरस (m-mlv) से प्राप्त किया जाता
m-mlv रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस की संरचना और कार्य
m-mlv रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस एक डीएनए-निर्भर डीएनए पॉलीमेरेस के रूप में कार्य करता है जिसमें आरएनए-निर्भर डीएनए पॉलीमेरेस और रिबोन्यूक्लेज़ एच (आरएनएज़ एच) दोनों गतिविधियां होती हैं। यह आरएनए टेम्पलेट्स को पहचानता है और डीएन
m-mlv रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस के अनुप्रयोग
सीडीएनए संश्लेषण: एम-एमएलवी आरटी का उपयोग करने वाली व्युत्क्रम प्रतिलेखन विधियां आरएनए सामग्री को सीडीएनए में बदलने के लिए उपयोग की जाने वाली सामान्य प्रक्रियाएं हैं। मात्रात्मक पीसीआर, जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण या सीडीएनए पुस्तकालय के निर्माण सहित डाउनस्ट्रीम अध्ययनों के लिए यह तकनीक अपरिहार्य
जीन क्लोनिंग: एम-एमएलवी आरटी का उपयोग करके, शोधकर्ता अपने आरएनए नमूनों से विशिष्ट जीन क्लोन कर सकते हैं। परिणामस्वरूप, विशेष जीन को अलग किया जा सकता है और बढ़ाया जा सकता है ताकि उन्हें कार्य के संदर्भ में आगे विश्लेषण किया जा सके।
अभिव्यक्ति विश्लेषण: किसी भी अभिव्यक्ति विश्लेषण तकनीक जैसे कि क्यूपीसीआर या माइक्रोएरे विश्लेषण में एक आवश्यक कदम में एंजाइम द्वारा आरएनएएस एच गतिविधि के माध्यम से मध्यस्थता किए गए सीडीएनए का संश्लेषण शामिल है। इन तरीकों से वैज्ञानिकों को यह पता लगाने का अवसर मिलता है कि जीन जैविक नमूनों में खुद को कैसे भिन्न
कार्यात्मक जीनोमिक्सः कार्यात्मक जीनोमिक्स में, एम-एमएलवी आरटी का उपयोग जटिल आरएनए आबादी से सीडीएनए पुस्तकालय तैयार करने के लिए किया जाता है। इन पुस्तकालयों को तब विशिष्ट कार्यों या फेनोटाइप वाले जीन के लिए स्क्रीनिंग किया जाता है जिससे जीन समारोह और बातचीत पर नई अंतर्दृष्टि प्रकट होती है
लाभ और विचार
m-mlv रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस के कई फायदे हैं जैसे उच्च दक्षता, विशिष्टता और पुनः प्रयोज्यता। हालांकि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि एंजाइम इष्टतम तापमान, पीएच मानों के साथ-साथ नमक सांद्रता जैसी विशिष्ट परिस्थितियों में अच्छी तरह से काम करता है। कभी-कभी सीडीएनए सं
निष्कर्ष में, एम-एमएलवी रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेस विभिन्न अनुप्रयोगों के लिए आरएनए टेम्पलेट्स से सीडीएनए को संश्लेषित करने के लिए आणविक जीव विज्ञान अनुसंधान में एक उपयोगी उपकरण है। जीन क्लोनिंग, अभिव्यक्ति विश्लेषण और कार्यात्मक जीनोमिक्स अध्ययन एम-एमएलवी आरटी पर बहुत अधिक निर्भर करते हैं क्योंकि