ról m-mlv reverse transcriptase i sintéis CDNA

m-mlv reverse transcriptaseIs einsím tóir é i bitheolaíocht mhóilíneach a chatalaíonn trascriú an rna go dna comhlántach (cdna) agus a thagann ó víreas leucéimí moloney murine. Is einsím riachtanach é chun na géiní a chlóniú agus a shraithú agus a úsáidí a

feidhmchlár i bitheolaíocht mhóilíneach

Tá sé seo i gceist le cóipeanna de ghléin spriocdhírithe a ionchorprú i vectóirí plasmid chun iad a iompar i mbaictéirí nó i n-orgánaigh bheo eile. Feictear a úsáid freisin i leabharlanna CDNA, atá ina chórais de mhóilíneachtaí CDNA a chuirtear isteach a léiríonn

buntáistí agus teorainneacha

Tá roinnt buntáistí ag m-mlv reverse transcriptase, ina measc an cumas chun próiseáil agus fírinneacht ard a chumasú, atá inmhianaithe i gcomhdhéanamh móilíní CDNA fada. fós, tá roinnt míbhuntáistí leis an einsím seo, lena n-áirítear an méid atá ag roinnt struchtúir atá ann sa te

teicnící agus prótacail

Chun an M-MLV Trascríobhaire Inbhéartach a úsáid go héifeachtach, ní mór aird speisialta a thabhairt do fhachtóirí cosúil le rogha na bpríomhoibrithe, teocht an imoibrithe agus comhoibriú na bholgáin i measc nithe eile. Ní mór na príomhoibrithe a thógáil ar bhealach nach bhfuil lúbanna gruaige ann agus go gcuirtear an ceangail leis an mblagán RNA uasmhéid. Meastar go bhfuil 42°C, a bhfuil sé coitianta do na himoibrithe sin, mar teocht oiriúnach do imoibriú einsím, ionas go mbeidh gníomhaíocht agus cobhsaíocht na heinsímí uasmhéid. Ar an gcoinne, d'fhéadfadh úsáid substaintí eile cosúil lecosclóirí rnasea choinneáil ar an RNA a d'fhéadfadh a bheith scriosta le linn an imoibrithe.

réimsí sa todhchaí

Is féidir leis an teicneolaíocht seo a chomhcheangal le seiceáil reatha an chéad ghlúin eile a d'fhéadfadh dul chun cinn níos nuálacha fós maidir le cur chun cinn léiriúcháin géine agus ionchais fheidhmiúlachta a staidéar.

go hachomair, is gné riachtanach í m-mlv reverse transcriptase i dtaighde bitheolaíochta móilíneach ar bhonn an tábhachta a bhaineann léi chun CDNA a thabhairt isteach i gcealla. cé go bhfuil dúshláin á gcomhlíonadh go leanúnach, tá béim ar fhorbairt teicneolaíochtaí nua a fheabhsúfaidh saintréithe an m