Protéinase K solution 20 mg ml RT stable

protéase k solution, 20mg/ml(>680U/ml), stable à température ambiante

Description

Conditions de stockage

Utilisation quotidienne/hebdomadaire : conserver le flacon à RT
Pour un stockage à long terme (utilisation occasionnelle ; 1-2 fois par mois) : 2-4°C
Date de péremption trois ans pour la poudre et 12 mois pour le liquide stérile

Tampon de stockage : 20 mM Tris-HCl (pH 7,4), 1 mM CaCl2, 50 % de glycérine (tampon de dilution sans glycérine).

Essais de QC

• Définition de l'unité : une unité est définie comme la quantité d'enzyme qui libère 1 μmol de tyrosine par minute à 37ºC, pH 7,5.
• Activité DNase : Aucune activité enzymatique détectable avec l'ADN λ après 6 heures d'incubation à 37ºC.
• Activité RNase : Aucune activité ribonucléase détectable après 16 heures d'incubation à 25ºC.

APPLICATIONS

La protéinase K est une sérine-protéinase à substrat non spécifique. Elle est très stable entre pH 4 et 12. Elle a été utilisée pour l'isolement de l'ARNm, de l'ADN génomique et pour digérer les protéines indésirables lors des préparations d'ADN et d'ARN provenant de différents types de cellules. Elle a également été utilisée dans la modification des glycoprotéines et l'étude de la structure des protéines. La protéinase K reste active avec du SDS, de l'urée et du EDTA.

La protéinase K est utilisée pour l'isolement des acides nucléiques natifs de haut poids moléculaire. Les enzymes comme les DNases et les RNases provenant de micro-organismes et de cellules mammifères sont rapidement inactivées par la protéinase K.
L'ajout de protéinase K dès la lyse cellulaire permet l'isolement d'ADN ou d'ARN de haut poids moléculaire natif et non endommagé. Une variété de méthodes ont été établies, qui sont documentées dans de nombreuses publications.

Récemment, la protéinase K a été utilisée pour détecter les protéines formant la SEB qui sont de manière unique résistantes à la clivage protéolytique de l'enzyme.
La protéinase K est très utile dans l'analyse de la structure membranaire par modification des protéines et glycoprotéines à la surface des cellules.
En raison de la spécificité de clivage de la protéinase K, des fragments caractéristiques de protéines sont obtenus, ce qui aide à révéler la structure et la fonction des protéines, en particulier des enzymes.

Autres noms

• protéase k
• endopéptidase K
• Protéase alcaline de Tritirachium
• Protéase K de Tritirachium album
• Sérine-protéase de Tritirachium album

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