solution d'inhibiteur de la ribonucléase de haute pureté - inhibiteur de la rnase 40 u/μl, optimale pour la protection de l'ARN dans la synthèse de la CDNA et les applications en biologie moléculaire

Description du produit

Présentation de notre solution d'inhibiteur de ribonucléase hautement pur, un réactif de qualité supérieure contenantInhibiteur de la rnaseà une concentration ultra-concentrée de 40 unités/μl. Cette solution est spécifiquement conçue pour offrir une protection maximale contre les ribonucléases lors de la manipulation de l'ARN dans diverses procédures de biologie moléculaire.

Les principales caractéristiques

• pureté exceptionnelle: l'inhibiteur de la ribonucléase est produit de manière recombinante et strictement purifié pour garantir un haut degré de pureté, ce qui garantit l'absence d'interférence avec vos expériences.

• formule ultraconcentrée: fourni à une concentration de 40 u/μl, cet inhibiteur permet une utilisation efficace dans des applications exigeantes où même des traces de rnase peuvent compromettre les résultats.

• activité à large spectre: l' inhibiteur neutralise efficacement un large éventail d'ARNases a, b, c et d' autres endo- et exoribonucléases, protégeant ainsi vos échantillons d'ARN de la dégradation.

• stable et actif: formulé pour une stabilité dans une gamme de températures et de ph, l'inhibiteur reste actif pendant le stockage et tout au long de divers protocoles expérimentaux.

• Compatibilité: idéal pour une utilisation avec des systèmes automatisés et des réactions préparées à la main, il est entièrement compatible avec les tampons et les enzymes couramment utilisés dans la synthèse de CDNA et les techniques de manipulation des acides nucléiques.

Les demandes

• synthèse de CDNA: essentielle pour prévenir la contamination par la rnase lors des réactions de transcription inverse, améliorant ainsi le rendement et l'intégrité de la CDNA synthétisée.

• Isolement et purification de l'ARN: composante essentielle des kits d'extraction et des processus de purification de l'ARN pour maintenir l'intégrité de l'ARN avant et après l'isolement.

• Le Northern Blot: assure un transfert et une hybridation d'ARN de haute qualité en inhibant l'activité de l'ARNase qui pourrait dégrader l'ARN sur les membranes.

• qpcr et rt-qpcr: protège les modèles d'ARN dans les essais quantitatifs de pcr et de transcription inverse, améliorant la sensibilité et la spécificité.

• Études d' interactions ARN-protéine: préserve les molécules ARN lors de la coimmunoprécipitation (rip) et d'autres expériences d' interaction ARN-protéine.

source

souche d'e. coli exprimant un clone recombinant qui porte le gène inhibiteur de la ribonucléase du placenta humain.

concentration

40 unités/μl.

définition de l'unité

une unité est définie comme la quantité d'inhibiteur de la ribonucléase recombinante nécessaire pour inhiber l'activité de 5 ng de ribonucléase a de 50%.

L'activité est mesurée par inhibition de l'hydrolyse du cytidine 23-monophosphate cyclique par la ribonucléase a.

tampon de stockage

20 mm d'hépes-koh ((ph7.6), 50 mm de kcl, 8 mm de dtt, 50% ((v/v) de glycérol

stockage

conserver à -20°C

contrôle de la qualité

absence d' endonucléase

1 μg d'ADN lambda est incubé avec 200 unités d'inhibiteur de la ribonucléase pendant 16 heures à 37°C.

Après l'incubation, l'ADN lambda est visualisé intact sur un gel d'agarose teinté de bromure d'éthidium pour vérifier l'absence d'endonucléase visible.

absence de nickase

1 μg de pbr322 de type i en supercoil est incubé pendant 4 heures à 37°C avec 200 unités d'inhibiteur de la ribonucléase.

Après l'incubation, l'ADN en superenroulement est visualisé sur un gel d'agarose teint de bromure d'éthidium pour vérifier l'absence de coupures ou de coupures visibles.

absence d'exonucléase

1 μg de marqueurs d'ADN lambda/hindiii est incubé pendant 16 heures à 37°C avec 200 unités d'inhibiteur de la ribonucléase.

Après l'incubation, les marqueurs d'ADN lambda/hindiii sont séparés par un gel d'agarose à 1% et colorés avec du bromure d'éthidium. Les marqueurs restent intacts sans être frottés.

absence de rnase et rnase latente

Pour détecter la présence d'une activité de la rnase, 1 uG d'ARN est incubé pendant 4 heures à 37°C avec 200 unités d'inhibiteur de la ribonucléase.

Après l'incubation, l'ARN est visualisé sous forme de bande intacte sur un gel d'agarose teinté de bromure d'éthidium pour vérifier l'absence de rnase visible.

Pour détecter la présence d'une activité rnase latente, 200 unités d'inhibiteur de la ribonucléase sont dénaturées à 70°C pendant 15 minutes et incubées avec 1ug d'ARN pendant 4 heures à 37°C.

Après l'incubation, l'ARN est visualisé sous forme de bande intacte sur un gel d'agarose teinté de bromure d'éthidium pour vérifier l'absence de rnase visible.

pureté physique

la pureté est ≥ 95%, selon le gel de polyacrylamide sds avec teinture bleue coomassie.

note d'utilisation

Le test de transcription standard et in vitro utilise un inhibiteur de la ribonucléase à une concentration finale de 1 u/ ul.