Solution d'inhibiteur de la ribonucléase de haute pureté - Inhibiteur de la RNase 40U/μl, optimal pour la protection de l'ARN dans la synthèse de l'ADNc et les applications en biologie moléculaire

Description du produit

Présentation de notre solution d'inhibiteur de ribonucléase hautement pur, un réactif de qualité supérieure contenant Inhibiteur de la rnase à une concentration ultra-concentrée de 40 unités/μl. Cette solution est spécifiquement conçue pour offrir une protection maximale contre les ribonucléases lors de la manipulation de l'ARN dans diverses procédures de biologie moléculaire.

Caractéristiques principales

• Pureté Exceptionnelle : L'Inhibiteur de Ribonucléase est produit par recombinaison et purifié rigoureusement pour garantir un haut degré de pureté, assurant ainsi qu'il n'y ait aucune interférence avec vos expériences.

• Formule Ultra-Concentrée : Fourni à une concentration de 40U/μl, cet inhibiteur permet une utilisation efficace dans les applications exigeantes où même de faibles quantités de RNase peuvent compromettre les résultats.

• Activité à Large Spectre : L'inhibiteur neutralise efficacement une large gamme de RNases A, B, C et d'autres endo- et exoribonucléases, protégeant vos échantillons d'ARN contre la dégradation.

• Stable et actif : formulé pour une stabilité à travers une gamme de températures et de conditions de pH, l'inhibiteur reste actif pendant le stockage et tout au long de divers protocoles expérimentaux.

• Compatibilité : idéal pour être utilisé avec des systèmes automatisés et des réactions préparées à la main, il est entièrement compatible avec les tampons et enzymes couramment utilisés dans la synthèse de cDNA et les techniques de manipulation des acides nucléiques.

Applications

• Synthèse de cDNA : essentiel pour prévenir la contamination par les RNases lors des réactions de transcription inverse, améliorant ainsi le rendement et l'intégrité du cDNA synthétisé.

• Isolation et purification de l'ARN : composant vital dans les kits d'extraction d'ARN et les workflows de purification pour maintenir l'intégrité de l'ARN avant et après l'isolation.

• Transfert Nord (Northern blotting) : garantit un transfert et une hybridation de haute qualité de l'ARN en inhibant l'activité des RNases qui pourrait dégrader l'ARN sur les membranes.

• qPCR et RT-qPCR : protège les modèles d'ARN dans les essais de PCR quantitative et de PCR quantitative par transcription inverse, améliorant la sensibilité et la spécificité.

• Études des interactions ARN-protéine : préserve les molécules d'ARN pendant la co-immunoprécipitation (RIP) et d'autres expériences d'interaction ARN-protéine.

source

Souche d'E. coli exprimant un clone recombinant porteur du gène de l'inhibiteur de ribonucléase du placenta humain.

Concentration

40 U/μl.

Définition de l'unité

Une unité est définie comme la quantité d'inhibiteur de ribonucléase recombinant nécessaire pour inhiber l'activité de 5 ng de ribonucléase A de 50 %.

L'activité est mesurée par l'inhibition de l'hydrolyse du cytidine 2’3’-cyclic monophosphate par la ribonucléase A.

Tampon de stockage

20mM HEPES-KOH (pH 7,6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50% (v/v) glycérine

Stockage

Conserver à -20°C

Contrôle Qualité

Absence d'endonucléase

1 μg d'ADN Lambda est incubé avec 200 unités d'inhibiteur de ribonucléase pendant 16 heures à 37°C.

Après incubation, l'ADN Lambda est visualisé intact sur un gel d'agarose coloré au bromure d'éthidium pour vérifier l'absence d'endonucléase visible.

Absence de nickase

1 μg de pBR322 superenroulé de type I est incubé avec 200 unités d'inhibiteur de ribonucléase pendant 4 heures à 37°C.

Après incubation, l'ADN superenroulé est visualisé sur un gel d'agarose coloré au bromure d'éthidium pour vérifier l'absence de coupures ou de nicks visibles.

Absence d'exonucléase

1 μg de marqueurs Lambda DNA/HindIII est incubé avec 200 unités d'inhibiteur de ribonucléase pendant 16 heures à 37°C.

Après incubation, les marqueurs Lambda DNA/HindIII sont séparés par un gel d'agarose à 1% et colorés au bromure d'éthidium. Les marqueurs restent en bandes intactes sans étalage.

Absence de RNase et de RNase latente

Pour tester la présence d'une activité RNase, 1 µg d'ARN est incubé avec 200 unités d'inhibiteur de ribonucléase pendant 4 heures à 37 °C.

Après l'incubation, l'ARN est visualisé comme une bande intacte sur un gel d'agarose coloré au bromure d'éthidium pour vérifier l'absence de RNase visible.

Pour tester la présence d'une activité RNase latente, 200 unités d'inhibiteur de ribonucléase sont dénaturées par la chaleur à 70 °C pendant 15 minutes et incubées avec 1 µg d'ARN pendant 4 heures à 37 °C.

Après l'incubation, l'ARN est visualisé comme une bande intacte sur un gel d'agarose coloré au bromure d'éthidium pour vérifier l'absence de RNase visible.

Pureté Physique

La pureté est ≥95 % selon le gel d'acrylamide SDS avec coloration au bleu de Coomassie.

Note d'Utilisation

L'inhibiteur de ribonucléase est actif dans une large gamme de pH (pH 5,5-9). L'utilisation standard en RT et en transcription in vitro utilise l'inhibiteur de ribonucléase à une concentration finale de 1 u/µl.