Mutant sensible au froid HotStar Taq ADN Polymerase
- Introduction
Introduction
Description du produit :
Notre polymérase Taq ADN HotStart sensible au froid Taq polymérase de l'ADN est une variante unique de la polymérase Taq traditionnelle, conçue avec une mutation sensible au froid qui empêche l'activité à température ambiante. Ce design innovant garantit que l'enzyme reste inactive jusqu'à l'étape de dénaturation initiale de la PCR, réduisant l'amplification non spécifique et la formation de dimères de primers.
Caractéristiques principales :
- Mutation cold-sensitive pour activation contrôlée
- Aucune activité à température ambiante, minimisant l'amplification non spécifique
- Spécificité et rendement améliorés de l'ADN cible
- Adapté au PCR touch-down et gradient PCR
- Performance améliorée dans les réactions PCR multiplexe
- Idéal pour les systèmes automatisés de manipulation liquide
Applications :
- PCR touch-down et gradient PCR
- PCR multiplexe pour l'amplification simultanée de plusieurs cibles
- Mise en place automatisée de PCR à l'aide de robots de manipulation liquide
- Tests diagnostiques nécessitant une grande spécificité
- Applications de recherche impliquant des modèles complexes ou en faible abondance
- Tests médico-légaux et cliniques où la spécificité est primordiale
Notre polymérase Taq ADN HotStart sensible au froid offre un avantage significatif dans les applications de PCR en fournissant un démarrage propre au processus d'amplification. Son activation contrôlée garantit un résultat plus ciblé et efficace, ce qui en fait un atout précieux pour les laboratoires cherchant à optimiser leurs workflows de PCR.
Description
Les polymérases CSM Taq (polymérases Taq mutantes sensibles au froid) sont un type de polymérase HotStar. Elles proviennent du mutant E. coli. Contrairement aux polymérases Taq hot start basées sur des anticorps monoclonaux ou chimiquement modifiées, Cold Taq est une polymérase Taq mutante sensible au froid. Elle conserve la capacité hot start tout au long des cycles d'amplification.
Les polymérases Taq mutantes sensibles au froid sont conçues pour la PCR Hot Start, elles ne sont pas actives à basse température. Elles offrent une excellente spécificité et une fidélité deux fois supérieure à celle du Taq sauvage. Elles sont conçues pour la PCR avec des modèles difficiles tels que les fragments riches en GC et les microsatellites.
Les polymérases Taq mutantes sensibles au froid conviennent particulièrement bien à l'extension de primers pour les marqueurs de Polymorphismes Nucléotidiques Uniques (SNP).
Les polymérases Taq mutantes sensibles au froid conservent une excellente spécificité et un faible bruit de fond même dans des conditions conçues pour un rendement élevé. En fait, même sur des modèles génomiques, l'enzyme peut être utilisée avec des concentrations de MgCl2+ allant jusqu'à 10 mM.
Les polymérases Taq mutantes sensibles au froid sont capables d'étendre à travers des régions difficiles, par exemple des régions qui incluent des répétitions inversées tandem et celles ayant une grande quantité de structure secondaire.
Les polymérases Taq mutantes sensibles au froid fonctionnent d'une manière totalement unique, impliquant une amélioration de la sélection des nucléotides au site actif, et un taux beaucoup plus faible d'extension de mauvaises correspondances, ce qui signifie que seuls les amorces parfaitement alignées seront étendues. En conséquence, l'enzyme peut offrir une spécificité encore plus élevée que les techniques de démarrage à chaud (manuel ou automatique) sans nécessiter d'étapes de pré-incubation inconfortables.
APPLICATIONS
- Amplification PCR de démarrage à chaud
- Amplification spécifique de cDNA complexe et de gabarits génomiques, pour l'amplification de gabarits difficiles, tels que des fragments riches en GC et des microsatellites
- Extension d'amorces de marqueurs SNP
- Amplification de cibles ADN génomiques jusqu'à 10 kb avec une grande fidélité, spécificité et sensibilité
- Amplification à partir de gabarits ADN à faible nombre de copies, PCR de démarrage à chaud haute performance avec une grande spécificité, sensibilité et rendement
- PCR diagnostique de démarrage à chaud routine nécessitant une grande reproductibilité.
- PCR en temps réel
- PCR multiplex
- Génération de produits PCR pour le clonage TA
Contrôle Qualité
- Absence fonctionnelle d'activité d'endonucléase à double et simple brin;
- Pureté > 99 % testée par électrophorèse sur gel SDS;
- Chaque lot de CSM Taq ADN polymérase est testé pour l'amplification à partir d'au moins 10 ng d'ADN génomique humain ;
- Conserve une activité complète à température ambiante pendant une semaine;
- Aucun résidu d'ADN hôte.
Préparation du mélange de réaction
CompoNent | Volume | Concentration finale |
Modèle | ADN <1 ug | comme requis |
Primier Avant (10 μM) | 2 μl | 0,4 μM |
Primier Arrière (10 μM) | 5 μl | 1x |
2,5 mM de chaque mélange de dNTP | 4 μl | 200 μM de chaque |
CSM Taq ADN polymérase, 5 U/μl | 0,4 μl | 2 unités |
ddH 2O pour un volume final | 50μl | Non Applicable |
Concentration : 5 u/μl
Stockage : Conserver à -20°C
Colis : Bulk
commande
PC05 | csm Taq ADN polymérase | Mutants sensibles au froid de la Taq ADN Polymerase, 5U/μl |