Benzonase

Nuclease Benzo recombinaire, Nuclease universelle, Endonucléase Benzonase non spécifique, 250U/µl, 50KU/fiole

Description

La Benzo Nuclease est une sorte d'endonucléase non spécifique. La Benzo Nuclease, endonucléase génétiquement modifiée issue de Serratia marcescens.

La Benzo Nuclease dégrade tous types d'ADN et d'ARN (double brin, simple brin, linéaire et circulaire ainsi que superenroulé) mais sans activité protéolytique. Elle est efficace sur une large gamme de conditions et possède une activité spécifique exceptionnellement élevée.

La Benzo Nuclease digère complètement les acides nucléiques en oligonucléotides terminés par un monophosphate en position 5', de 2 à 5 bases de longueur (en dessous de la limite d'hybridation), ce qui est idéal pour l'élimination des acides nucléiques des protéines recombinantes, permettant ainsi le respect des lignes directrices de la FDA concernant la contamination par les acides nucléiques. La capacité de la Benzo Nuclease à hydrolyser rapidement les acides nucléiques en fait un excellent choix pour réduire la viscosité, diminuer le temps de traitement et augmenter les rendements de protéines. Par exemple, l'enzyme est compatible avec les agents d'extraction de protéines BugBuster® et PopCulture®, et peut donc être ajoutée avec ces reagents pour éliminer la viscosité et retirer les acides nucléiques des extraits d'E. coli. L'enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle entre pH 6 et 10 et de 0 à 42°C, et nécessite 1-2 mM de Mg2+ pour son activation. L'enzyme reste active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d'agents réducteurs, de PMSF (1 mM), d'EDTA (1 mM) et d'urée (l'activité relative dépend des conditions spécifiques). Son activité est inhibée par des concentrations supérieures à 150 mM de cations monovalents, à 100 mM de phosphate, à 100 mM de sulfate d'ammonium ou à 100 mM de guanidine HCl.

• Source : Serratia marcescens
• Poids moléculaire : 27,9 kD (SDS)
• Pureté : ≥90 %, (Ultra≥99 %) (SDS-PAGE)
• PI : 6,85
• pH optimal : 8,0
• Température optimale : 37°C
• Cofacteur : 1～10 mM Mg2+
• Forme : Enzyme liquide est une solution claire (contient du glycérine)
• Enzyme solide est un poudre lyophilisée blanche.
• Concentration : 1000 U/µl.
• Activité : ≥1000U/μl
• Activité spécifique : ≥1,0x106U/mg de protéine
• Protéase : Non détectable
• Limite microbienne : aérobie <10CFU/100 KU Levures et moisissures : <10CFU/100 KU
• Test d'endotoxines : (Test de coagulation LAL)<0,25EU/1000U

Tampon de stockage

20 mM Tris-Cl (pH 8,0), 2 mM MgCl2, 2 mM NaCl, 50 % glycérine

Tampon de dilution

20 mM Tris-Cl (pH 8,0), 2 mM MgCl2, 2 mM NaCl.

Définition de l'unité

Une unité est définie comme la quantité d'enzyme qui provoque un ΔA260 de 1,0 en 30 minutes, ce qui correspond à la digestion complète de 37 µg d'ADN.

Application

• Sa haute activité intrinsèque et sa large tolérance aux substrats en font un outil idéal pour une variété d'applications biotechnologiques et pharmaceutiques :
• retrait de l'acide nucléique des échantillons de protéines
• Élimination des acides nucléiques des protéines recombinantes
• Purification de fragments de protéines à partir de corps d'inclusion;
• Préparation des échantillons en blotting ou électrophorèse en gel bidimensionnel
• Réduction de la viscosité dans les extraits de protéines.

Expédition et manipulation

Enzyme liquide : Expédier avec glace bleue, conserver à -20°C
Poudre lyophilisée : Expédier à température ambiante, conserver en dessous de 4°C

Garantie

2 ans

CAS : 9025-65-4

CE : 3.1.30.2

commande