گلیکوزیلاز DNA اوراسیل (UNG)، حساس به گرما

Uracil-DNA Glycosylase، E.coli، 1U/μl

توضیح

Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، نسخه حرارتی-حساس یک پروتئین بازتولیدی در E. coli است که از باکتری دریایی منشاء می‌باشد. این آنزیم به طور هیدرولیزیکوند اتصال گلیکوزیدیک بین اوراسیل و DNA را در DNA تک‌رشته‌ای و دوپاره‌ای شکست می‌دهد، اوراسیل را خارج می‌کند و نقاط حساس به قلیایی بدون پایه در DNA ایجاد می‌کند. این آنزیم روی RNA و DNA اصلی بدون اوراسیل فعالیت نمی‌کند. از آنجا که Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، نسخه حرارتی-حساس نیازی به یون‌های فلزی ندارد، در حضور EDTA کاملاً فعال است.

آنزیم Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile می‌تواند با dUTP برای حذف آلودگی‌های "حمل و نقل" در PCR از واکنش‌های قبلی سنتز DNA استفاده شود. برای آن که محصولات PCR قابل تخریب باشند، باید dTTP در مخلوط واکنش PCR با dUTP جایگزین شود. واکنش‌های PCR بعدی باید پیش از PCR با Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Thermolabile پیش‌درمانی شوند تا DNA شامل اوراسیل تخریب شود. DNA اصلی اوراسیل نمی‌گنجاند بنابراین نمونه توسط این روش تخریب نمی‌شود.

منبع: E. coli بازسازی شده

Carthy و اندازه: 1U/μL

تعریف واحد

یک واحد به عنوان مقدار Uracil-DNA Glycosylase (UNG) تعریف می‌شود که لازم است برای کاملاً تخریب 1 میکروگرم DNA تک رشته‌ای حاوی اوراسیل در دماي 37 درجه سانتیگراد در مدت زمان 60 دقیقه.

مایع ذخیره‌سازی

20mM Tris-HCl (pH8.0)، 0.1mM EDTA، 100mM KCl، 1mM DTT، 0.5%(v/v) Tween-20، 0.5%(v/v) NP-40، 50%(v/v) گلیسرول.

کنترل کیفیت

صافی >99% توسط SDS-PAGE

هیچ آلودگی از اندونوکلاز، نیکاز، اکسونوکلاز و RNase وجود ندارد.

غیرفعال‌سازی با گرما

50°C برای 2 دقیقه

دماي واکنش

20~37°C برای 10 دقیقه.

مقدار مصرف

0.1~1U آنزیم UNG برای هر واکنش 50 میکرولیتری.

ارسال و ذخیره سازی

ذخیره سازی در دمای -20°C، ارسال با یخ ژل.

سفارش