پلیمراز DNA، پلیمراز pcr بلند
- مقدمه
مقدمه
PCR طولانیپلیمراز DNA, 5U/μl
شرح
سطح پلیمراز DNA سه برابر بیشتر از پلیمراز DNA است.
پلیمراز pcr طولانی که به طور همکاره محصولات pcr طولانی را با بهره وری و وفاداری بیشتر از پلیمراز DNA تک تولید می کنند.
وفاداری PCR سه برابر بیشتر از پلیمراز DNA است.
لا تق برای تولید آمپلیکون های بسیار طولانی بهینه شده است: تا 40 کیلو بایت با DNA ویروسی و تا 15 کیلو بایت با الگوهای DNA ژنومیک. بافر خاص La Taq از DNA در طول چرخه های گرمای طولانی از پاکسازی و کنده شدن محافظت می کند.
محصولات PCR تولید شده با پلیمراز DNA لاکاک عمدتا 3'-da هستند که می توانند در بردار تکثیر شوند.
ویژگی ها
- محصولات pcr بلند
- تا 40 kb با DNA ویروسی به عنوان قالب
- تا 15 kb با DNA ژنومیک به عنوان قالب
- ایده آل برای قالب های غنی از GC تا 85٪ GC.
- وفاداری سه برابر بیشتر از پلیمراز DNA taq است.
- محصول بالا. شامل نوکلئوتايد هاي اصلاح شده است.
کنترل کیفیت
به طور عملکردی در تولید آمپلیکون 40 kb با DNA لامبدا به عنوان الگوی آزمایش شده است.
غلظت: 5 واحد/میل
ذخیره سازی
بافر ذخیره سازی: آنزیم در: 20 میلی متر tris-hcl (ph 8.0) ؛ 0.1 میلی متر edta؛ 1 میلی متر dtt؛ 100 میلی متر kcl؛ ثبات دهنده ها؛ 50٪ گلیسیرول فراهم می شود.
نگهداری: در دمای -20 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
واکنش
واکنش مخلوط pcr تنظیم و توصیه شده شرایط چرخه حرارتی: جریان تنها یک مثال است که یک 20kb DNA ژنومیک انسان را به عنوان الگوی، که فقط برای مرجع، آن را می توان با توجه به طول و توالی الگوی و پرایمر تنظیم کرد.
اجزا | حجم | غلظت نهایی |
قالب | DNA <1 ug | طبق نیاز |
پیشرو (۱۰ مکیومتر) | 1 μl | هر یک 0.2-0.4 μm |
پریمر معکوس (10 μm) | 1 μl | هر یک 0.2-0.4 μm |
10x بافر قافیه | 5 μl | 1x |
2.5 میلی متر در ساعت | 4 μl | 0.2 میلی متر |
لا تاق DNA پولیمراز | 0.5μl | 2.5 واحد |
ddh2o تا حجم نهایی | 50μl | قابل اجرا نیست |
94°C 3 دقیقه
94°C 30 ثانیه
55°C 30 ثانیه 30 چرخه
72°C 1 دقیقه
72 درجه در 5 دقیقه
نظم
pc08 | لا تاق DNA پولیمراز | پکر بلند تک DNA پلیمراز، 5u/μl |