محصولات

محلول مهار کننده ریبونوکلیس بسیار خالص - مهار کننده rnase 40u/μl، بهینه برای حفاظت از rna در سنتز cdna و کاربردهای زیست شناسی مولکولی

مقدمه

مقدمه

توضیحات محصول

معرفی محلول مهارکننده ریبونوکلئاز با خلوص بالا، یک معرف با کیفیت بالا که دارایمهار کننده rnaseدر غلظت فوق متمرکز 40 واحد/μl است. این محلول به طور خاص برای ارائه حداکثر حفاظت در برابر ریبونوکلئازها در حین کار با RNA در روش‌های مختلف زیست‌شناسی مولکولی طراحی شده است.

ویژگی های کلیدی

خلوص استثنایی: مهار کننده ریبونوکلاز به صورت ترکیب تولید شده و به شدت تصفیه شده است تا درجه بالایی از خلوص را تضمین کند و هیچ تداخل در آزمایشات شما را تضمین کند.
فرمول فوق متمرکز: در غلظت 40u / μl عرضه می شود، این مهار کننده اجازه می دهد تا برای استفاده موثر در برنامه های کاربردی سخت استفاده شود که حتی مقدار کمی از rnase می تواند نتایج را به خطر بیندازد.
فعالیت طیف گسترده: مهار کننده به طور موثر طیف گسترده ای از rnases a، b، c و دیگر endo- و exoribonucleases را خنثی می کند، و نمونه های RNA را از تخریب محافظت می کند.
پایدار و فعال: برای ثبات در طیف وسیعی از دمای و شرایط ph، مهار کننده در طول ذخیره سازی و در طول پروتکل های مختلف آزمایشی فعال باقی می ماند.
سازگاری: ایده آل برای استفاده با سیستم های خودکار و واکنش های آماده شده دستی، کاملا با بافرها و آنزیم هایی که معمولا در سنتز CDNA و تکنیک های دستکاری اسید نوکلئیک استفاده می شوند سازگار است.

برنامه های کاربردی

سنتز CDNA: برای جلوگیری از آلودگی rnase در طول واکنش های ترجمه معکوس ضروری است، بنابراین عملکرد و یکپارچگی CDNA سنتز شده را بهبود می بخشد.
جداسازی و تصفیه RNA: یک جزء حیاتی در کیت های استخراج RNA و جریان های کار تصفیه برای حفظ یکپارچگی RNA قبل و بعد از جداسازی.
لکه ی شمالی: انتقال RNA با کیفیت بالا و هیبرید شدن را با مهار فعالیت rnase که می تواند RNA را در غشا تخریب کند، تضمین می کند.
qpcr و rt-qpcr: از الگوهای RNA در آزمایش های کمی pcr و ترجمه معکوس pcr محافظت می کند، حساسیت و خاصیت را افزایش می دهد.
مطالعات تعاملات RNA- پروتئین: مولکول های RNA را در طول co-immunoprecipitation (rip) و سایر آزمایشات تعامل RNA- پروتئین حفظ می کند.

منبع

گونه ای از E. coli که یک کلون ترکیب شده را بیان می کند که ژن مهار کننده ریبونوکلیس را از جفت انسان حمل می کند.

غلظت

40 واحد در لیتر

تعریف واحد

یک واحد به عنوان مقدار مورد نیاز مهار کننده ریبونوکلیز ترکیب شده تعریف می شود تا فعالیت 5ng ریبونوکلیز a را 50٪ مهار کند.

فعالیت این ماده با مهار هیدرولیز cytidine 23-cyclic monophosphate توسط ریبونوکلیس a اندازه گیری می شود.

بافر ذخیره سازی

20mm hepes-koh ((ph7.6), 50mm kcl, 8mm dtt, 50% ((v/v) گلیسیرول

ذخیره سازی

در -20°C نگهداری شود

کنترل کیفیت

عدم وجود اندونوکلیز

1μg از DNA لامبدا با 200 واحد مهار کننده ریبونوکلیز برای 16 ساعت در 37 درجه سانتیگراد تزریق می شود.

پس از انکوبیشن، DNA لامبدا به صورت سالم بر روی ژل آگاروز با رنگ برومید اتیدیوم به منظور تأیید عدم وجود اندونوکلیز قابل مشاهده به تصویر کشیده می شود.

عدم وجود نیکاز

1μg از pbr322 نوع I که در حال فراورده شدن است با 200 واحد مهار کننده ریبونوکلیز برای 4 ساعت در 37 درجه سانتیگراد تزریق می شود.

پس از انکوباسیون، DNA فوق لوله شده بر روی ژل آگاروز با رنگ برومید اتیدیوم به منظور بررسی عدم وجود شکاف یا برش قابل مشاهده، تجسم می شود.

عدم وجود اکسونوکلیز

۱μg از نشانگرهای لامپدا DNA/hindiii با ۲۰۰ واحد مهار کننده ریبونوکلیز برای ۱۶ ساعت در دما ۳۷ درجه سانتیگراد تزریق می شود.

پس از انکوبیشن، نشانگرهای DNA لامبدا/هندیii با ژل آگاروز ۱٪ جدا می شوند و با برومید اتیدیوم رنگ می شوند. نشانگرها بدون روغن کردن به صورت نوارهای سالم باقی می مانند.

عدم وجود rnase و rnase پنهان

برای آزمایش وجود فعالیت rnase، 1ug rna با 200 واحد مهار کننده ریبونوکلیز برای 4 ساعت در 37 °C تزریق می شود.

پس از انکوبیشن، RNA به صورت یک نوار سالم روی یک ژل آگاروز با رنگ برومید اتیدیوم به منظور تأیید عدم وجود rnase قابل مشاهده به تصویر کشیده می شود.

برای آزمایش وجود فعالیت rnase پنهان، 200 واحد از مهار کننده ریبونوکلیس در دمای 70 درجه سانتیگراد برای 15 دقیقه گرمایی را تغییر داده و با 1 یوگ rna برای 4 ساعت در 37 درجه سانتیگراد انکوبیشن می شود.

پاکدلی فیزیکی

طهارت ≥95٪ با استفاده از ژل sds-polyacrylamide با رنگ آبی coomassie.

یادداشت استفاده

مهار کننده ریبونوکلاز در محدوده گسترده ای از PH (ph5.5-9) فعال است.