m-mlv pöördtranskriptaasi roll ja rakendused molekulaarbioloogias

Ensiimid on olnud olulised erinevate biokeemiliste reaktsioonide puhul seoses molekulaarbioloogia alati dünaamilise valdkonnaga.m-mlv pöördtranskriptaas(m-mlv rt), mis on üks nendest ensüümidest, on viimasel ajal saanud palju tähelepanu, kuna see on võimeline sünteesima rna maltidest CDNA-d. See ensüüm, mis saadakse Moloney murine leukemia viirusest (m-mlv), on laialdaselt kasutatud geenide kloonimisel

m-mlv pöördtranskriptaasi struktuur ja funktsioon

m-mlv pöördtranskriptaas toimib DNA-sõltuva DNA polümeraasi funktsioonina, millel on nii rna-sõltuva DNA polümeraasi kui ka ribonukleaasi h (rnase h) aktiivsus. See tunnistab rna malle ja sünteesib CDNA-kiud, kasutades substra

m-mlv pöördtranskriptaasi rakendused

CDNA süntees: m-mlv rt-d kasutavad pöördtranskriptsiooni meetodid on tavalised protseduurid, mida kasutatakse rna sisu CDNA-deks muundamiseks.

Gene kloonimine: m-mlv rt abil saavad teadlased kloonida oma RNA näidistest teatud geenid. Seega saab teatud geenid isoleerida ja võimendada, et neid saaks funktsiooni poolest veelgi analüüsida.

Ekspressioonianalüüs: mis tahes ekspressioonianalüüsimeetodite, nagu qpcr- või mikroarray-analüüsi, oluline samm on ensüümi vahendatud rnaasi h-aktiivsuse kaudu sünteesitud CDNA-d. Nende meetodite abil saavad teadlased võimaluse teada, kuidas geenid oma keha bioloogilistes

Funktsionaalse genoomi: funktsionaalses genoomi kasutatakse m-mlv rt-d keerukate RNA populatsioonidest CDNA raamatukogude valmistamiseks. Neid raamatukogusid vaadatakse siis kindlaksmääratud funktsioonidega või fenootüüpidega geenide suhtes, paljastades seeläbi uusi teadmisi geeni funktsiooni ja koosto

eelised ja kaalutlused

m-mlv pöördtranskriptaasil on mitu eelist, näiteks kõrge tõhusus, spetsiifilisus ja reprodutseeritavus. Siiski tuleb märkida, et ensüüm toimib hästi konkreetsetel tingimustel, nagu optimaalne temperatuur, pH väärtused ja soola kontsentratsioon. Mõnikord on CDNA sünteesi ajal rna š

Kokkuvõttes on m-mlv pöördtranskriptaas molekulaarbioloogia uuringutes kasulik vahend rna maltidega CDNA sünteesimiseks erinevate rakenduste jaoks. Gene kloonimine, ekspresssiooni analüüs ja funktsionaalne genoomiuuringud tuginevad tugevalt m-mlv rt-le, kuna sellel