MMLV Pöörtranskriptase, massipakk IVD jaoks - Termistabiilne M-MLV Pöörtranskriptase (RNase H-)

Termiliselt stabiilne pöörtranskriptase, RNase H Miinus, reaktsiooni temperatuur kuni 55°C, 200U/μl

Kirjeldus

MMLV reverstskriptase, kodeeritud Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV RT) poolt, on RNA-sõltuv DNA-poliimerase, mis süntetiseerib komplementaarse esimese cDNA-lõigu ühestikulmest RNA-mallist, millele primmeer on hübrideeritud. MMLV RT võib ka lülitada primmeerid, mis on hübrideeritud ühestikulmestse DNA-ga. Teine cDNA-lõigu süntees saab toimuda mõnedel mRNA-mallidel ilma lisandatud DNA-poliimeraseta. Erinevus tavalisest M-MLV RT sees on see, et sellel on suuremat lämmastamisvõimet. See säilitab 100% aktiivsuse temperatuuril 50°C ja enam kui 80% aktiivsust isegi temperatuuril 55°C.

allikas

E. coli rekombinatsioon, mis sisaldab Moloneyi murdoleukemiaviirusi pöörtranskriptasegeeni kloniist.

Rakendused

Esimene cDNA-lõigu süntees; RT-PCR

Omadused

• RNase H tegevus puudub: Nõrgane RNase H tegevus, kõrge cDNA tootmine, võimalik saada rohkem täieliku cDNA.
• termoStabiilne: optimaalne reaktsiooni temperatuur on 50°C, maksimaalne on 60°C. Võib ületada mall-RNA teine struktuuri ning lõpetada reverst-transkriptoraasi eksperiment soomelt.
• lai temperatuurivahemik: võib teostada reverst-transkriptsiot 37-60°C vahemikus, kus temperatuuridel 42°C-55°C hoiab endiselt enam kui 80% oma maksimaalsest tegevusest. Kliendi valik temperatuuri on vaba.
• Tugev amplifitseerimisaktiivsus: gene mutatsioon suurendas enzyymi ja RNA vahelisi sidususi. Suurendas amplifitseerimiskiirust, saab kvaliteetset cDNA-d, sobib cDNA-bibliotiigi loomiseks.

Ühikute defineerimine

Üks MMLV RT ühik katalüüsib 1 nmoole dTTP sisestamist hape äratuhandmatavasse materjali 10 minutiga 37°C temperatuuril, kasutades oligo(dT)12-18-primmitud poly(A)n mallina.

Kontsentraatsioon : 200U/μl

Pakend : Massiivne

Komponent : M-MLV (200U/μl) 5xBuffer (koos DTT-ga)

salvestus : -20°C

tellimus