m-mlv pöördtranskriptaas: mitmekülgne vahend molekulaarbioloogias
keerulises molekulaarbioloogia kontekstis on ensüümidel väga oluline roll erinevate biokeemiliste reaktsioonide hõlbustamisel. Neis peetakse pöördtranskriptaase väga huvitavateks ensüümideks, sest neil on võime muuta rna DNA-ks, protsess, mida nimetatakse pöördtranskriptsiooniks. m-m
Teadlikkusm-mlv pöördtranskriptaas
m-mlv pöördtranskriptaas on tuletatud Moloney murine leukemia viirust (mo-mulv), retroviirust, mis kasutab seda ensüümi oma genoomi kopeerimiseks peremeesrakku. See muudab selle oluliseks vahendiks molekulaarklonimiseks, geenide ekspressiooni analüüsimiseks
olulised omadused ja eelised
kõrge usaldusväärsus ja tundlikkus
M-mlv pöördtranskriptaasi üks eelis on see, et see näitab suurt usaldusväärsust, mistõttu RNA DNA-ks muundamisel tehakse minimaalseid vigu. Seetõttu aitab see funktsioon säilitada geneetilist teavet pöördtranskriptsiooni ajal, eriti geenide ekspresssiooni uuringute ajal, kus oodatakse täiustatud tulemusi. Lisaks võimaldab
mitmekülgsus reaktsiooni tingimustes
Samuti on tõestatud, et m-mlv pöördtranskriptaas võib toimida erinevates reaktsiooni tingimustes tõhusalt. Täpsemalt ei takista temperatuuri äärmuslikud muutused, pH-fluktuatsioonid ja soola sisalduse erinevus selle toimimist, muutes selle sobivaks paljudeks eksperimentaalsetele seadmetele.
kooskõla pikete maltidega
Erinevalt teistest RTs-dest,m-mlv pöördtranskriptaason võimeline transkripteerima pika RNA molekule täisläbimõõduga CDNA-sse. See on eriti kasulik CDNA raamatukogude loomisel sõnumitooja RNA-st (MRNA) või suurte geenide kloonimisel. Seetõttu sünteesib m-mlv pöördtranskriptase täielikke CDNA koopiaid
rakendused teadusuuringutes ja diagnostikas
geeneekspressiooni analüüs
m-mlv pöördtranskriptaasi abil mRNA CDNA-sse muundamine on geeniekspressiooni uuringutes väga väärtuslik, kus mRNA taset saab kvantifitseerida selliste meetodite abil nagu qpcr (kogupolümeraasi ahelreaktsioon). Seega saavad teadlased võrrelda erinevate geenide ekspresssiooni tas
kloonimine ja molekulaarbioloogia
M-mlv pöördtranskriptaas on kloonimiseksperimentide jaoks hädavajalik, sest see suudab sünteesida täispikkuse CDNA-d RNA-vormidest. Seetõttu võivad teadlased soovida luua CDNA-raamatukogu, mis identifitseerib konkreetsed geenid täiendava uurimise jaoks, kloonib neid vektoriteks
viiruseaduste uuringud
Nagu ka teised retroviirused, on m-mlv pöördtranskriptaasi uurimistööd kasutatud retroviiruse replikatsiooni ja patogeensuse uurimistes. Need uuringud aitavad mõista, kuidas viiruse genoomid integreeruvad, kuidas need aktiveeruvad ja mis põhjustab patsientide tervise halvenemist, aidates seega nende
järeldus
m-mlv pöördtranskriptaasi võib kasutada geeniekspressiooni analüüsimiseks, kloonimiseksperimendideks ja viroloogiaks kui olulist vahendit, kuna see on väga usaldusväärne, tundlik ja kohaneda saab reaktsioonide tingimustega.