HiFi III M-MLV Pöörtranskriptasa (RNase H-)

Toote kirjeldus:

Meie HiFi III m-mlv pöördtranskriptaas (RNase H-) on tipptasemel ensüüm, mis on loodud kõrge täpsusega tagasikandmise rakenduste jaoks. See ensüüm on muudetud versioon Moloney hiire leukeemia viirusest (M-MLV) tagasikandja, mis on loodud RNase H aktiivsuse puudumisega, vähendades seeläbi RNA lagunemist cDNA sünteesi ajal.

Peamised omadused:

• Muundatud M-MLV pöörtranskriptaseta, mis ei oma RNase H aktiivsust
• Erakordne usaldusväärsus ja tõhusus cDNA sünteesis
• Sobib täismoodulise mRNA ja pikemate mallide pöörtranskriptsiooniks
• Vähendatud RNA degradatsioon parema malli säilitamiseks
• Ühilduv laia valdkonna RT-PCR pufferrahastega
• Tüdruklik litsentsiga cDNA loomiseks järgmiseks kasutamiseks

Rakendused:

• PöörtranskriptsioonipCR (RT-pCR)
• cDNA-biblioteekide süntees ridadeks ja klooneerimiseks
• Geneespressiooni analüüs
• RNA-viruste tuvastamine ja kuantifitseerimine
• Harva esinevate või madalalt ekspresseeritud RNA-transkriptide amplifitseerimine
• Haridus- ja uurimiskeskkonnad RNA-uuringuteks

Meie HiFi III M-MLV Pöörtranskriptase (RNase H-) on tugev tööriist uurijatele, kes teevad pöörtranskriptsiooni eksperimente. Selle kõrge usaldusväärsus ja RNase H-tegevuse puudumine tagavad, et RNA-mallid transkribeeritakse täpselt cDNA-ks, pakkudes kindlat alust järgnevate molekulaarbioloogia testide jaoks.

Kirjeldus

MMLV reverstskriptase, kodeeritud Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV RT) poolt, on RNA-sõltuv DNA-poliimerase, mis süntetiseerib komplementaarse esimese cDNA-lõigu ühestikulmest RNA-mallist, millele primmeer on hübrideeritud. MMLV RT võib ka lülitada primmeerid, mis on hübrideeritud ühestikulmestse DNA-ga. Teine cDNA-lõigu süntees saab toimuda mõnedel mRNA-mallidel ilma lisandatud DNA-poliimeraseta. Erinevus tavalisest M-MLV RT sees on see, et sellel on suuremat lämmastamisvõimet. See säilitab 100% aktiivsuse temperatuuril 50°C ja enam kui 80% aktiivsust isegi temperatuuril 55°C.

allikas

E. coli rekombinatsioon, mis sisaldab Moloneyi murdoleukemiaviirusi pöörtranskriptasegeeni kloniist.

Rakendused

Esimene cDNA-lõigu süntees; RT-PCR

Omadused

• RNase H tegevus puudub: Nõrgane RNase H tegevus, kõrge cDNA tootmine, võimalik saada rohkem täieliku cDNA.
• termoStabiilne: optimaalne reaktsiooni temperatuur on 50°C, maksimaalne on 60°C. Võib ületada mall-RNA teine struktuuri ning lõpetada reverst-transkriptoraasi eksperiment soomelt.
• lai temperatuurivahemik: võib teostada reverst-transkriptsiot 37-60°C vahemikus, kus temperatuuridel 42°C-55°C hoiab endiselt enam kui 80% oma maksimaalsest tegevusest. Kliendi valik temperatuuri on vaba.
• Tugev amplifitseerimisaktiivsus: gene mutatsioon suurendas enzyymi ja RNA vahelisi sidususi. Suurendas amplifitseerimiskiirust, saab kvaliteetset cDNA-d, sobib cDNA-bibliotiigi loomiseks.

Ühikute defineerimine

Üks MMLV RT ühik katalüüsib 1 nmoole dTTP sisestamist hape äratuhandmatavasse materjali 10 minutiga 37°C temperatuuril, kasutades oligo(dT)12-18-primmitud poly(A)n mallina.

Kontsentraatsioon : 200U/μl

Pakend : Massiivne

Komponent : M-MLV (200U/μl) 5xBuffer (koos DTT-ga)

salvestus : -20°C

tellimus