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PCR y RT Enzimas PCR

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LA Taq DNA Polymerase, Long PCR Polymerase

  • Introducción
Introducción

Long PCR La taq polimerasa del ADN , 5U/μl

Descripción

LA Taq DNA Polymerase es tres veces más eficiente que la Taq DNA Polymerase

Long PCR Polymerase que sinérgicamente genera productos de PCR largos con mayor rendimiento y fidelidad que la Taq DNA Polymerase sola.

La fidelidad de la PCR es tres veces mayor que con la Taq DNA Polymerase.

LA Taq está optimizado para la generación de amplicones muy largos: hasta 40 kb con ADN viral y hasta 15 kb con plantillas de ADN génico. El buffer LA Taq especialmente formulado protege al ADN de la despurinación y el corte durante ciclado térmico prolongado.

Los productos de PCR generados con LA Taq DNA Polymerase son principalmente colas de 3'-dA, lo que permite su clonación en un vector TA.

Características

  • Productos de PCR larga
  • hasta 40 kb con ADN viral como plantilla
  • hasta 15 kb con ADN génico como plantilla
  • Ideal para plantillas ricas en GC hasta un 85% de GC.
  • La fidelidad es tres veces mayor que con la Taq DNA Polymerase.
  • Altos rendimientos. Incorpora nucleótidos modificados.

Control de Calidad

Funcionalmente probado en la generación de un amplión de 40 kb con ADN lambda como plantilla.

Concentración : 5 u/μl

Almacenamiento

Buffer de almacenamiento: La enzima se suministra en: 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1mM EDTA; 1mM DTT; 100mM KCl; Estabilizadores; 50% glicerol.

Almacenamiento: Conservar a -20°C.

reacción

Preparación de la mezcla de reacción PCR y condiciones recomendadas de ciclado térmico: Lo siguiente es solo un ejemplo que toma un ADN genómico humano de 20KB como plantilla, solo como referencia, puede ajustarse según la longitud y la secuencia de la plantilla y el iniciador.

Componente Volumen concentración final
Plantilla ADN <1 ug según sea necesario
primer de adelante (10 μm) 1 μl 0,2-0,4 μm cada uno
primer inverso (10 μm) 1 μl 0,2-0,4 μm cada uno
Buffer 10x LA Taq 5 μl 1x
Las medidas de seguridad de los vehículos 4 μl 0,2 mm
LA Taq ADN Polimerasa 0, 5 μl Unidad 2.5
ddH2O hasta el volumen final 50 μl No se aplica

94°C 3 min
94°c 30 segundos
55°C 30 seg 30 ciclos
72°C 1 min
72°C 5 min.

orden

PC08 LA Taq ADN Polimerasa Larga PCR Taq ADN Polimerasa, 5U\/μl

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