Solución de inhibidor de la ribonucleasa de alta pureza - inhibidor de la rnasas 40 u/μl, óptimo para la protección del ARN en la síntesis de CDNA y aplicaciones de biología molecular

Descripción del producto

Presentamos nuestra Solución de Inhibidor de Ribonucleasa de Alta Pureza, un reactivo de calidad premium que presentaInhibidor de la rnasasa una concentración ultra-concentrada de 40 Unidades/μl. Esta solución está específicamente diseñada para proporcionar la máxima protección contra ribonucleasas durante el manejo de ARN en varios procedimientos de biología molecular.

Las características clave

• excepcional pureza: el inhibidor de la ribonucleasa se produce de forma recombinante y se purifica rigurosamente para garantizar un alto grado de pureza, asegurando que no interfiera con sus experimentos.

• fórmula ultraconcentrada: suministrada a una concentración de 40 u/μl, este inhibidor permite un uso eficiente en aplicaciones exigentes donde incluso cantidades trazas de rnasa pueden comprometer los resultados.

• actividad de amplio espectro: el inhibidor neutraliza eficazmente una amplia gama de rnasas a, b, c y otras endo- y exoribonucleasas, salvaguardando sus muestras de RNA de la degradación.

• estable y activo: formulado para ser estable en una gama de temperaturas y condiciones de pH, el inhibidor permanece activo durante el almacenamiento y durante varios protocolos experimentales.

• Compatibilidad: ideal para su uso con sistemas automatizados y reacciones preparadas a mano, es totalmente compatible con búferes y enzimas comúnmente utilizados en la síntesis de CDNA y técnicas de manipulación de ácidos nucleicos.

Las aplicaciones

• Síntesis de CDNA: esencial para prevenir la contaminación de la rnasas durante las reacciones de transcripción inversa, mejorando así el rendimiento y la integridad del CDNA sintetizado.

• El aislamiento y la purificación del ARN: componente vital en los kits de extracción del ARN y en los flujos de trabajo de purificación para mantener la integridad del ARN antes y después del aislamiento.

• La eliminación de la sangre por la mancha norteña: asegura la transferencia de ARN de alta calidad e hibridación inhibiendo la actividad de la arnas que podría degradar el ARN en las membranas.

• qpcr y rt-qpcr: protege las plantillas de ARN en ensayos de pcr cuantitativos y transcripción inversa, mejorando la sensibilidad y especificidad.

• Estudios de interacciones entre ARN y proteínas: preserva las moléculas de ARN durante la coinmunoprecipitación (rip) y otros experimentos de interacción entre ARN y proteínas.

Fuente de información

cepa de e. coli que expresa un clon recombinante que lleva el gen inhibidor de la ribonucleasa de la placenta humana.

concentración

40 u/μl.

definición de unidad

una unidad se define como la cantidad de inhibidor de la ribonucleasa recombinante requerida para inhibir la actividad de 5ng de la ribonucleasa a en un 50%.

La actividad se mide mediante la inhibición de la hidrólisis del monofosfato ctidina 23-cíclico por la ribonucleasa a.

el buffer de almacenamiento

20 mm de hepes-koh (ph7.6), 50 mm de kcl, 8 mm de dtt, 50% (v/v) de glicerol

almacenamiento

almacenar a -20°C

Control de calidad

ausencia de endonucleasa

Se incubará 1 μg de ADN lambda con 200 unidades de inhibidor de la ribonucleasa durante 16 horas a 37°C.

Después de la incubación, el ADN de la lambda se visualiza intacto en un gel de agarosa teñido de bromuro de etidio para verificar la ausencia de endonucleasa visible.

ausencia de niquasa

Se incubará 1 μg de pbr322 superenrolado de tipo i con 200 unidades de inhibidor de la ribonucleasa durante 4 horas a 37°C.

Tras la incubación, el ADN superenrolado se visualiza en un gel de agarosa teñido de bromuro de etidio para verificar la ausencia de cortes o cortes visibles.

ausencia de exonucleasa

Se incubará 1 μg de marcadores de ADN lambda/hindiii con 200 unidades de inhibidor de la ribonucleasa durante 16 horas a 37°C.

Después de la incubación, los marcadores de ADN lambda/hindiii se separan con un 1% de gel de agarosa y se teñen con bromuro de etidio. Los marcadores permanecen intactos sin manchar.

ausencia de rnasas y rnasas latentes

Para evaluar la presencia de actividad de la rnasas, se incubará 1 ug de rna con 200 unidades de inhibidor de la ribonucleasa durante 4 horas a 37°C.

Después de la incubación, el ARN se visualiza como una banda intacta en un gel de agarosa teñido de bromuro de etidio para verificar la ausencia de arnasa visible.

Para comprobar la presencia de actividad latente de la rnasas, 200 unidades de inhibidor de la ribonucleasa se desnaturalizan en calor a 70°C durante 15 minutos e incubadas con 1 ug de rna durante 4 horas a 37°C.

Después de la incubación, el ARN se visualiza como una banda intacta en un gel de agarosa teñido de bromuro de etidio para verificar la ausencia de arnasa visible.

La pureza física

la pureza es ≥95% según lo juzgado por el gel de poliacrilamida sds con tinción azul coomassie.

Nota de uso

La transcripción estándar rt y in vitro utiliza un inhibidor de la ribonucleasa en una concentración final de 1 u/ ul.