Mutante sensible al frío HotStar Taq ADN Polimerasa
- Introducción
Introducción
Descripción del Producto:
Nuestra Taq HotStart mutante sensible al frío La taq polimerasa del ADN es una variante única de la polimerasa Taq tradicional, diseñada con una mutación sensible al frío que previene la actividad a temperatura ambiente. Este diseño innovador asegura que la enzima permanezca inactiva hasta el paso de desnaturalización inicial de la PCR, reduciendo la amplificación no específica y la formación de dímeros de cebador.
Características principales:
- Mutación sensible al frío para activación controlada
- Sin actividad a temperatura ambiente, minimizando la amplificación no específica
- Especificidad y rendimiento mejorados del ADN objetivo
- Adecuado para PCR de descenso y PCR de gradiente
- Rendimiento mejorado en reacciones de PCR múltiple
- Ideal para sistemas automatizados de manipulación de líquidos
Aplicaciones:
- PCR de descenso y PCR de gradiente
- PCR múltiple para la amplificación simultánea de múltiples objetivos
- Configuraciones de PCR automatizadas utilizando robots de manejo de líquidos
- Pruebas diagnósticas que requieren alta especificidad
- Aplicaciones de investigación que involucran plantillas complejas o de baja abundancia
- Pruebas forenses y clínicas donde la especificidad es primordial
Nuestra HotStart Taq DNA Polymerase sensible al frío ofrece una ventaja significativa en aplicaciones de PCR al proporcionar un inicio limpio al proceso de amplificación. Su activación controlada asegura un resultado más dirigido y eficiente, convirtiéndola en un activo valioso para laboratorios que buscan optimizar sus flujos de trabajo de PCR.
Descripción
Las polimerasas CSM Taq (polimerasas Taq sensibles al frío) son un tipo de polimerasa HotStar. Proceden del mutante E. coli. A diferencia de las polimerasas Taq de inicio caliente basadas en anticuerpos monoclonales o químicamente modificadas, Cold Taq es el mutante Taq sensible al frío. Conserva la capacidad de inicio caliente durante todo el ciclo de amplificación.
Las polimerasas Taq mutantes sensibles al frío están diseñadas para PCR de Inicio en Caliente, no lo es a bajas temperaturas. Ofrece una excelente especificidad y una fidelidad dos veces mayor que la Taq salvaje. Está diseñado para PCR con plantillas difíciles, como fragmentos ricos en GC y microsatélites.
Las polimerasas Taq mutantes sensibles al frío son particularmente adecuadas para la extensión de iniciadores de marcadores de Polimorfismos de Un Nucleótido (SNP).
Las polimerasas Taq mutantes sensibles al frío mantienen una excelente especificidad y un fondo mínimo incluso en condiciones diseñadas para un alto rendimiento. De hecho, incluso en plantillas genómicas, la enzima puede usarse con concentraciones de MgCl2+ tan altas como 10 mM.
Las polimerasas Taq mutantes sensibles al frío son capaces de extenderse a través de regiones difíciles, por ejemplo, regiones que incluyen repeticiones invertidas en tandem y aquellas con gran cantidad de estructura secundaria.
Las mutantes de Taq polímeras sensibles al frío funcionan de una manera totalmente única, que implica una mejora en la selección de nucleótidos en el sitio activo y una tasa mucho menor de extensión de errores, lo que significa que solo los iniciadores perfectamente alineados se extenderán. Como resultado, la enzima puede ofrecer una especificidad aún mayor que las técnicas de inicio caliente (manual o automático) sin la necesidad de pasos de preincubación incómodos.
Aplicaciones
- Amplificación de PCR de inicio caliente
- Amplificación específica de plantillas de cDNA y genómicas complejas, para la amplificación de plantillas difíciles, como fragmentos ricos en GC y microsatélites
- Extensión de iniciadores de marcadores SNP
- Amplificación de objetivos de ADN genómico hasta 10 kb con alta fidelidad, especificidad y sensibilidad
- Amplificación a partir de plantillas de ADN de bajo número de copias, PCR de inicio caliente de alto rendimiento con alta especificidad, sensibilidad y rendimiento
- PCR de diagnóstico rutinario de inicio caliente que requiere alta reproducibilidad.
- PCR en Tiempo Real
- PCR múltiple
- Generación de productos de PCR para clonación TA
Control de Calidad
- ausencia funcional de actividad de la endonucleasa de doble y de cadena única;
- prueba de pureza> 99% mediante electroforesis por gel SDS;
- Cada lote de CSM Taq DNA Polymerase se ensaya para amplificación a partir de tan poco como 10 ng de ADN genómico humano;
- mantener la actividad completa a temperatura ambiente durante una semana;
- No hay residuos de ADN del huésped.
Se ha establecido la mezcla de reacción
Componente | Volumen | concentración final |
Plantilla | ADN <1 ug | según sea necesario |
primer de adelante (10 μm) | 2 μl | 0.4 μM |
primer inverso (10 μm) | 5 μl | 1x |
2.5mM de cada dNTPmix | 4 μl | 200μM de cada |
CSM Taq DNA polymerase, 5U/μl | 0.4 μl | 2 unidades |
D.h. 2o al volumen final | 50 μl | No se aplica |
Concentración : 5 u/μl
Almacenamiento : Almacenar a -20°C
Paquete : a granel
orden
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | Mutantes sensibles al frío de la Taq ADN Polimerasa, 5U/μl |