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Enzimas pcr y rt pcr

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Resfriado sensible mutante de la polimerasis de la ADN de la estrella caliente taq

  • Introducción
Introducción

Descripción del producto:

Nuestra Taq HotStart mutante sensible al fríoLa taq polimerasa del ADNes una variante única de la polimerasa Taq tradicional, diseñada con una mutación sensible al frío que previene la actividad a temperatura ambiente. Este diseño innovador asegura que la enzima permanezca inactiva hasta el paso de desnaturalización inicial de la PCR, reduciendo la amplificación no específica y la formación de dímeros de cebador.

Las características principales:

  • mutación sensible al frío para activación controlada
  • No hay actividad a temperatura ambiente, lo que minimiza la amplificación no específica
  • Especificidad y rendimiento mejorados del ADN objetivo
  • adecuado para pcr de desnivel y pcr de pendiente
  • Mejoras en el rendimiento en reacciones pcr múltiples
  • ideal para sistemas automatizados de manipulación de líquidos

aplicaciones:

  • Pcr de descenso y pcr de pendiente
  • Pcr múltiple para la amplificación simultánea de múltiples objetivos
  • Instalaciones de PCR automatizadas con robots de manipulación de líquidos
  • ensayos de diagnóstico que requieren una alta especificidad
  • aplicaciones de investigación que incluyan plantillas complejas o de baja abundancia
  • pruebas forenses y clínicas en las que la especificidad es primordial

Nuestra polimerasa de ADN mutante de arranque caliente sensible al frío ofrece una ventaja significativa en aplicaciones de PCR al proporcionar un comienzo limpio al proceso de amplificación. Su activación controlada asegura un resultado más específico y eficiente, lo que la convierte en un activo valioso para los laboratorios que buscan optimizar sus flujos

Descripción

La polimerasa de taq es un tipo de polimerasa de hotstar. fuente del E. coli mutante. A diferencia de la polimerasa de taq de inicio caliente basada en anticuerpos monoclonales o taq de inicio caliente modificada químicamente, la taq fría es la taq mutante sensible al frío. retiene la capacidad de inicio caliente

Las polimerasas de taq mutantes sensibles al frío están diseñadas para PCR de arranque en caliente, no a baja temperatura. Ofrece una excelente especificidad y una fidelidad dos veces mayor que el tipo salvaje de taq. Está diseñada para PCR con plantillas difíciles como fragmentos ricos en GC y microsatélites.

Las polimerasas taq mutantes sensibles al frío son particularmente adecuadas para la extensión de primeras de marcadores de polimorfismo de nucleótido único (snp).

Las polimerasas taq mutantes sensibles al frío mantienen una excelente especificidad y un fondo mínimo incluso en condiciones diseñadas para un alto rendimiento. De hecho, incluso en plantillas genómicas, la enzima puede usarse con concentraciones de mgcl2+ de hasta 10 mm.

Las polimerasas taq mutantes sensibles al frío son capaces de extenderse a través de regiones difíciles, por ejemplo, regiones que incluyen repeticiones de tándem invertidas y aquellas con grandes cantidades de estructura secundaria.

Las polimerasas taq mutantes sensibles al frío funcionan de una manera totalmente única, que implica una mejor selección de nucleótidos en el sitio activo y una tasa mucho menor de extensión de desajuste, lo que significa que solo se extenderán primers perfectamente alineados. como resultado, la enzima puede dar una especificidad aún mayor que las técnicas de arran

Las aplicaciones

  • Amplificación de PCR de arranque en caliente
  • amplificación específica de CDNA complejo y plantilla genómica, para la amplificación de plantillas difíciles, como fragmentos ricos en gc y microsatélites
  • extensión de primeras de marcadores de SNP
  • amplificación de objetivos genómicos de ADN de hasta 10 kb con alta fidelidad, especificidad y sensibilidad
  • amplificación desde una plantilla de ADN con un número de copias bajo, pcr de arranque en caliente de alto rendimiento con alta especificidad, sensibilidad y rendimiento
  • PCR de routine de diagnóstico de arranque en caliente que requiere una alta reproducibilidad.
  • Pcr en tiempo real
  • Pcr múltiple
  • Producción de productos de PCR para la clonación

Control de calidad

  • ausencia funcional de actividad de la endonucleasa de doble y de cadena única;
  • prueba de pureza> 99% mediante electroforesis por gel SDS;
  • Cada lote de polimerasas de ADN csm taq se analizará para la amplificación a partir de tan sólo 10 ng de ADN genómico humano;
  • mantener la actividad completa a temperatura ambiente durante una semana;
  • No hay residuos de ADN del huésped.

Se ha establecido la mezcla de reacción

Componentevolumenconcentración final
modeloADN < 1 ugsegún sea necesario
primer de adelante (10 μm)2 μl0,4 μm
primer inverso (10 μm)5 μl1x
2,5 mm cada una de las mezclas de DNT4 μl200 μm cada uno
csm taq polimerasa de ADN, 5 u/μl0,4 μl2 unidades
D.h.2o al volumen final50 μlNo se aplica

concentración: 5 u/μl

almacenamiento: almacenar a -20°C

paquete: a granel

orden

el punto 05.csm taq polimerasa de ADNPolímerasas de ADN mutantes taq sensibles al frío, 5 u/μl

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