Λύσιμο υψηλής καθαρότητας αναστολέα ριβοπυρηνικής αγωγής - αναστολέας ρινοάσης 40u/μl, βέλτιστο για την προστασία του ρινοαμοιογενούς στην σύνθεση cdna και σε εφαρμογές μοριακής βιολογίας
- Εισαγωγή
Εισαγωγή
περιγραφή του προϊόντος
Εισάγουμε τη Λύση Υψηλής Πυκνότητας Αναστολέα Ριβονουκλεάσης, ένα αντιδραστήριο premium ποιότητας που διαθέτειαναστολέας ρνασηςσε υπερσυγκεντρωμένη μορφή 40 Μονάδες/μλ. Αυτή η λύση έχει σχεδιαστεί ειδικά για να παρέχει μέγιστη προστασία από τις ριβονουκλεάσες κατά τη διάρκεια χειρισμού RNA σε διάφορες διαδικασίες μοριακής βιολογίας.
βασικά χαρακτηριστικά
Εξαιρετική καθαρότητα: ο αναστολέας ριβοπυρηνικής αγωγής παράγεται με συνδυασμό και καθαρίζεται αυστηρά για να εξασφαλίζεται υψηλός βαθμός καθαρότητας, εξασφαλίζοντας ότι δεν παρεμβαίνει στα πειράματά σας.
υπερσυγκεντρωμένη φόρμουλα: παρέχεται σε συγκέντρωση 40u/μl, ο αναστολέας αυτός επιτρέπει την αποτελεσματική χρήση σε απαιτητικές εφαρμογές όπου ακόμη και μικρές ποσότητες ρνάσης μπορούν να θέσουν σε κίνδυνο τα αποτελέσματα.
ευρύ φάσμα δράσης: ο αναστολέας εξουδετερώνει αποτελεσματικά ένα ευρύ φάσμα α, β, γ και άλλων ενδο- και εξωριβοπυρηνικών αγωγών, προστατεύοντας τα δείγματα α από την υποβάθμιση.
σταθερός και ενεργός: διαμορφωμένος για σταθερότητα σε ένα εύρος θερμοκρασιών και συνθηκών pH, ο αναστολέας παραμένει ενεργός κατά τη διάρκεια της αποθήκευσης και σε όλα τα πειραματικά πρωτόκολλα.
συμβατότητα: ιδανικό για χρήση με αυτοματοποιημένα συστήματα και χειροποίητες αντιδράσεις, είναι πλήρως συμβατό με τα αμυντικά και τα ένζυμα που χρησιμοποιούνται συνήθως στη σύνθεση CDNA και τις τεχνικές χειρισμού νουκλεϊκών οξέων.
αιτήσεις
Σύνθεση CDNA: απαραίτητη για την πρόληψη της μόλυνσης με rnase κατά τις αντιστροφικές αντιδράσεις μεταγραφής, βελτιώνοντας έτσι την απόδοση και την ακεραιότητα του συνθετικού CDNA.
Απομόνωση και καθαρισμός RNA: ζωτικής σημασίας συστατικό σε σετ εκχύλισης RNA και ροές εργασίας καθαρισμού για τη διατήρηση της ακεραιότητας του RNA πριν και μετά την απομόνωση.
Βόρεια θολωτική: εξασφαλίζει υψηλής ποιότητας μεταφορά RNA και υβριδισμό αναστέλλοντας τη δραστηριότητα της RNA που θα μπορούσε να υποβαθμίσει το RNA στις μεμβράνες.
qpcr και rt- qpcr: προστατεύει τα πρότυπα RNA σε ποσοτικές pcr και αντιστροφικές μεταγραφές ποσοτικών pcr, αυξάνοντας την ευαισθησία και την ειδικότητα.
Μελέτες αλληλεπιδράσεων RNA- πρωτεΐνης: διατηρεί τα μόρια RNA κατά τη διάρκεια της συν- ανοσοπρεσπείας (rip) και άλλων πειραμάτων αλληλεπίδρασης RNA- πρωτεΐνης.
πηγή
στέλεχος E. coli που εκφράζει ένα ανασυνδυασμένο κλώνο που μεταφέρει γονίδιο αναστολέα ριβονουκλεάσης από ανθρώπινο πλακούντα.
συγκέντρωση
40 μ.ου./μl.
Ορισμός μονάδας
μία μονάδα ορίζεται ως η ποσότητα αναδυόμενου αναστολέα ριβονουκλεάσης που απαιτείται για να αναστείλει την δραστηριότητα 5ng ριβονουκλεάσης α κατά 50%.
Η δραστικότητα μετριέται με την αναστολή της υδρόλυσης της κυτιδίνης 23- κυκλικού μονοφωσφορικού από ριβοπυρηνική α.
αποθηκευτικό απόθεμα ασφαλείας
20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% (v/v) γλυκερίνη
αποθήκευση
αποθηκεύεται σε θερμοκρασία -20°C
Ελέγχος ποιότητας
απουσία ενδοπυρήνασης
1 μg λανμπντα DNA εκκολάπτεται με 200 μονάδες αναστολέα ριβονουκλεάσης για 16 ώρες σε θερμοκρασία 37°C.
Μετά την επώαση, το DNA λαμπντά απεικονίζεται ως άθικτο σε ένα τζελ αγαρόζης με βρομίδιο αιθυδίου για να επαληθευτεί η απουσία ορατής ενδοπυρήνας.
απουσία νικάζης
1 μg pbr322 τύπου i σε υπερτροχιά εκκολάπτεται με 200 μονάδες αναστολέα ριβονουκλεάσης για 4 ώρες σε θερμοκρασία 37°C.
Μετά την επώαση, το υπερστροφικό DNA απεικονίζεται σε ένα τζελ αγαρόζης με βρομίδιο αιθυδίου για να επαληθευτεί η απουσία ορατών κοψίματος ή κοπής.
απουσία εξωπυρήνασης
1 μg δεικτών lambda dna/hindiii εκκολάπτονται με 200 μονάδες αναστολέα ριβονουκλεάσης για 16 ώρες σε θερμοκρασία 37°C.
Μετά την επώαση, οι δείκτες lambda DNA/hindiii διαχωρίζονται με 1% τζελ αγαρόζης και χρωματίζονται με βρομίδιο αιθυδίου. Οι δείκτες παραμένουν άθικτες ζώνες χωρίς να αλείφονται.
απουσία ρινάσης και λανθάνουσα ρινάση
Για να ελεγχθεί η παρουσία δραστηριότητας της ρινάσης, 1 μg ρινάλης εκκολάπτεται με 200 μονάδες αναστολέα ριβονουκλεάσης για 4 ώρες σε θερμοκρασία 37°C.
Μετά την επώαση, το RNA απεικονίζεται ως άθικτη ζώνη σε ένα τζελ αγαρόζης με βρομίδιο αιθυδίου για να επαληθευτεί η απουσία ορατής rnase.
Για να ελεγχθεί η παρουσία λανθάνουσας δραστηριότητας της ριβονουκλεάσης, 200 μονάδες αναστολέα ριβονουκλεάσης θερμικά εκμηδενίζονται σε θερμοκρασία 70°C για 15 λεπτά και επωάζονται με 1 μg ρινοαμίνης
Μετά την επώαση, το RNA απεικονίζεται ως άθικτη ζώνη σε ένα τζελ αγαρόζης με βρομίδιο αιθυδίου για να επαληθευτεί η απουσία ορατής rnase.
φυσική καθαρότητα
Η καθαρότητα είναι ≥95% όπως κρίνεται με σίδηρο polyacrylamide gel με γαλάζιο χρώμα coomassie.
σημείωμα χρήσης
Η τυπική rt και in vitro μεταγραφή χρησιμοποιεί αναστολέα ριβονουκλεάσης σε τελική συγκέντρωση 1u/ ul.