HiFi II M-MLV Αντιστροφής Τρανσκρίψεως (RNase H-)

Περιγραφή προϊόντος:

Η HiFi II m-mlv αντιστροφή μεταγραφάσης (RNase H-) είναι ένα εξαιρετικά αποδοτικό ένζυμο σχεδιασμένο για εφαρμογές αναστροφής της μεταγραφής που απαιτούν ελάχιστη αποδόμηση RNA. Αυτό το ένζυμο είναι μια τροποποιημένη έκδοση του ιού λευχαιμίας του Moloney Murine (M-MLV) αναστραφής τρανσκριπτάσης, που στερείται δραστηριότητας RNase H, η οποία αποτρέπει την αποδόμηση του RNA προτύπου κατά τη διάρκεια της σύνθεσης cDNA.

Κύρια Χαρακτηριστικά:

• Τροποποιημένη Αντιστροφής Τρανσκριπτάσης M-MLV χωρίς δραστηριότητα RNase H
• Ύψιστη ακρίβεια και αποτελεσματικότητα στη σύνθεση cDNA
• Επιτρέπει την αντιστροφή μεταγραφή πλήρους μήκους mRNA
• Μειωμένη διάβρωση RNA για καλύτερη διαφύλαξη του προτύπου
• Συμβατή με ευρύ φάσμα συνθημάτων RT-PCR
• Ιδανική για την παραγωγή υψηλής ποιότητας cDNA για εφαρμογές μετά

Εφαρμογές:

• Αντιστροφής μεταγραφή PCR (RT-PCR)
• Σύνθεση βιβλιοθηκών cDNA για ακολουθία και κλωνοποίηση
• ανάλυση της γονιδιακής έκφρασης
• Ανίχνευση και ποσιμοποίηση ΡΝΑ ιού
• Επέκταση σπάνιων ή χαμηλής εμφάνισης μεταγραφών ΡΝΑ
• Διδακτικά και ερευνητικά πλαίσια για μελετής ΡΝΑ

Το HiFi II M-MLV Reverse Transcriptase (RNase H-) μας είναι ένα απαραίτητο εργαλείο για τους ερευνητές που διεξάγουν πειράματα αντιστροφής μεταγραφής. Η έλλειψή του σε δραστηριότητα RNase H εξασφαλίζει ότι οι προτύποι ΡΝΑ παραμένουν ακέραιοι, προκαλώντας πιο ακριβή και εξαρτήτη σύνθεση cDNA.

Περιγραφή

Η MMLV Reverse Transcriptase, κωδικοποιείται από τον ιό Moloney Murine Leukemia Virus (MMLV RT) και είναι ένα RNA-εξαρτημένο DNA πολυμεράζ που σύνθεται το πρώτο φιλά συμπληρωματικού cDNA από ένα μονοστρωματικό υποδείγμα RNA στο οποίο έχει συνδεθεί ένας πρωτεύων. Η MMLV RT μπορεί επίσης να επεκτείνει πρωτεύοντα που έχουν συνδεθεί σε μονοστρωματικό DNA. Η σύνθεση του δεύτερου φιλού cDNA μπορεί να επιτευχθεί από κάποια πρότυπα mRNA χωρίς τη χρήση επιπλέον DNA πολυμεράζ. Η διαφορά μεταξύ αυτής και της γενικής M-MLV RT είναι ότι η ικανότητα να αντέχει τη θερμότητα έχει ενισχυθεί. Μπορεί να διατηρεί το 100% της δραστηριότητας στους 50°C και να διατηρεί πάνω από το 80% της δραστηριότητας ακόμη και στους 55°C.

πηγή

ανασυνδυασμός του E. coli που περιέχει γονίδιο αντίστροφης μεταγραφής του ιού λευχαιμίας Moloney από κλώνο Moloney από ποντίκια.

Εφαρμογές

Η σύνθεση πρώτου φιλού cDNA; RT-PCR

Χαρακτηριστικά

• έλλειψη δραστηριότητας της ρινάσης h: χαμηλή δραστηριότητα της ρινάσης h υψηλή απόδοση CDNA, μπορεί να αποκτήσει περισσότερο CDNA πλήρους μήκους.
• θερμοσταθερό: η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 50°C, η υψηλότερη είναι 60°C. μπορεί να ξεπεράσει την δευτερογενή δομή πρότυπου RNA και να ολοκληρώσει το πείραμα αντίστροφης μεταγραφής ομαλά.
• ευρύ εύρος θερμοκρασίας: μπορεί να αντιστρέψει την ανάλυση από 37-60 °C, με περισσότερο από 80% της υψηλότερης δραστηριότητας σε 42 °C-55 °C ο πελάτης μπορεί να επιλέξει ελεύθερα τη θερμοκρασία αντίδρασης.
• Δραστηριότητα ισχυρής επεξεργασίας: Η μεταλλάξη του γονιδίου ενίσχυσε την ικανότητα δέσμευσης του ένζυμου και του RNA. Αύξησε την ταχύτητα επεξεργασίας, μπορεί να αποκτήσει ποιοτικό cDNA, κατάλληλο για την κατασκευή βιβλιοθήκης cDNA.

Ορισμός μονάδας

μία μονάδα mmlv rt καταλύει την ενσωμάτωση 1 nmol dttp σε αδιάλυτο υλικό σε οξύ σε 10 λεπτά σε θερμοκρασία 37°C χρησιμοποιώντας ως πρότυπο το πολυμετάλλευμα με ολιγοστοιχείο (dt) 12-18-α.

Συγκέντρωση : 200 μl/μl

Συσκευασία : χύδην

CompoNent : m-mlv (200 μl/μl) 5xαμπόριο (με dtt)

Αποθήκευση -20°C

παραγγελία