hochreine Ribonuklease-Hemmerlösung - Rnase-Hemmer 40 u/μl, optimal für den RNS-Schutz bei der CDNA-Synthese und bei Anwendungen in der Molekularbiologie

Produktbeschreibung

Einführung unserer hochreinen Ribonuklease-Inhibitor-Lösung, ein Reagenz von Premium-Qualität mitRnase-Hemmerin einer ultra-konzentrierten Konzentration von 40 Einheiten/μl. Diese Lösung ist speziell entwickelt, um maximalen Schutz gegen Ribonukleasen während der RNA-Handhabung in verschiedenen Verfahren der Molekularbiologie zu bieten.

Hauptmerkmale

• außergewöhnliche Reinheit: Der Ribonuklease-Hemmer wird rekombinant hergestellt und streng gereinigt, um einen hohen Reinheitsgrad zu gewährleisten und so keine Störungen bei Ihren Versuchen zu gewährleisten.

• Ultrakonzentrierte Formel: Dieser Inhibitor wird in einer Konzentration von 40 u/μl geliefert und ermöglicht einen effizienten Einsatz in anspruchsvollen Anwendungen, bei denen sogar Spurenmengen von rnase die Ergebnisse beeinträchtigen können.

• Breitbandaktivität: Der Inhibitor neutralisiert effektiv eine Vielzahl von RNasen a, b, c und anderen Endoribonukleasen und exoribonukleasen, wodurch Ihre RNA-Proben vor dem Abbau geschützt werden.

• stabil und aktiv: Der Inhibitor ist stabil in einer Vielzahl von Temperaturen und pH-Bedingungen und bleibt während der Lagerung und während der verschiedenen Versuchsprotokolle aktiv.

• Kompatibilität: ideal für den Einsatz mit automatisierten Systemen und handgefertigten Reaktionen, voll kompatibel mit Puffern und Enzymen, die häufig bei der CDNA-Synthese und bei Nukleinsäure-Manipulationstechniken verwendet werden.

Anwendungen

• CDNA-Synthese: wesentlich zur Verhinderung der Kontamination mit Rnase während der Reverse-Transkriptionsreaktionen, wodurch die Ausbeute und Integrität der synthetisierten CDNA verbessert werden.

• RNS-Isolation und -Reinigung: wichtiger Bestandteil von RNS-Extraktions-Kits und Reinigungsarbeiten, um die RNS-Integrität vor und nach der Isolation zu erhalten.

• Northern Blot: sorgt für hochwertigen RNA-Transfer und Hybridisierung, indem er die RNA-Aktivität hemmt, die die RNA auf Membranen abbauen könnte.

• qpcr und rt-qpcr: schützt RNA-Vorlagen in quantitativen pcr- und umgekehrter Transkription quantitative pcr-Assays, die Sensibilität und Spezifität zu erhöhen.

• Studien zur Wechselwirkung von RNA-Protein: Er bewahrt RNA-Moleküle während der Co-Immunprezipation (RIP) und anderer Experimente zur Wechselwirkung von RNA-Protein.

Quelle

E. coli-Stamm, der einen rekombinanten Klone ausdrückt, der ein Ribonuklease-Inhibitor-Gen aus der menschlichen Plazenta trägt.

Konzentration

40 m/l.

Einheitsdefinition

Eine Einheit ist definiert als die Menge an rekombinanten Ribonuklease-Hemmern, die erforderlich ist, um die Aktivität von 5ng Ribonuklease a um 50% zu hemmen.

Die Aktivität wird durch die Hemmung der Hydrolyse von Cytidin 23-cyclischem Monophosphor durch Ribonuklease a gemessen.

Speicherpuffer

20 mm Hepes-koh ((ph7.6), 50 mm Kcl, 8 mm Dtt, 50% (v/v) Glycerin

Aufbewahrung

bei -20°C aufbewahren

Qualitätskontrolle

Abwesenheit von Endonuklease

1 μg Lambda-DNA wird mit 200 Einheiten Ribonuklease-Hemmer 16 Stunden lang bei 37°C inkubiert.

Nach der Inkubation wird die Lambda-DNA intakt auf einem mit Ethidiumbromid befleckten Agarose-Gel dargestellt, um die Abwesenheit sichtbarer Endonuklease zu überprüfen.

Nichase fehlt

1 μg Typ I-supergewickeltes PBR322 wird mit 200 Einheiten Ribonukleasehemmer 4 Stunden lang bei 37°C inkubiert.

Nach der Inkubation wird die übergewickelte DNA auf einem mit Ethidiumbromid gefärbten Agarose-Gel visualisiert, um zu überprüfen, ob keine sichtbaren Schnitte oder Schnitte vorliegen.

Abwesenheit von Exonuklease

1 μg von Lambda-DNA/hindiii-Markern werden mit 200 Einheiten Ribonuklease-Inhibitor 16 Stunden lang bei 37°C inkubiert.

Nach der Inkubation werden die Lambda-DNA/hindiii-Marker durch ein Agarose-Gel von 1% getrennt und mit Ethidiumbromid gefärbt. Die Marker bleiben als intakte Bande ohne Aufschmieren.

Abwesenheit von Rnase und latente Rnase

Um auf die Anwesenheit von Rnaseaktivität zu testen, wird 1 ug Rna 4 Stunden lang bei 37°C mit 200 Einheiten Ribonukleasehemmer inkubiert.

Nach der Inkubation wird die RNA als intaktes Band auf einem mit Ethidiumbromid gefärbten Agarose-Gel visualisiert, um die Abwesenheit sichtbarer Rnase zu überprüfen.

Um auf das Vorhandensein latenter Rnase-Aktivität zu prüfen, werden 200 Einheiten des Ribonuklease-Inhibitors 15 Minuten lang bei 70°C thermisch denaturiert und 4 Stunden lang bei 37°C mit 1 ug Rna inkubiert.

Nach der Inkubation wird die RNA als intaktes Band auf einem mit Ethidiumbromid gefärbten Agarose-Gel visualisiert, um die Abwesenheit sichtbarer Rnase zu überprüfen.

körperliche Reinheit

Die Reinheit beträgt ≥ 95%, gemessen an sds-Polyacrylamid-Gel mit coomassie-blauer Färbung.

Anmerkung zur Verwendung

Die Standard-RT und in vitro-Transkription verwenden einen Ribonuklease-Hemmer in einer Endkonzentration von 1 u/ul.