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Kältesensible Mutant HotStar Taq DNA Polymerase

  • Einführung
Einführung

Produktbeschreibung:

Unser kälteempfindlicher mutierter HotStart taq-DNA-Polymerase ist eine einzigartige Variante der traditionellen Taq-Polymerase, die mit einer kälteempfindlichen Mutation entwickelt wurde, die die Aktivität bei Raumtemperatur verhindert. Dieses innovative Design stellt sicher, dass das Enzym bis zum ersten Denaturierungsschritt der PCR inaktiv bleibt, wodurch nicht-spezifische Amplifikation und Primer-Dimer-Bildung reduziert werden.

Hauptmerkmale:

  • Kältesensitive Mutation für kontrollierte Aktivierung
  • Keine Aktivität bei Raumtemperatur, minimiert nicht-spezifische Verstärkung
  • Verbesserte Spezifität und Ausbeute des Ziel-DNAs
  • Geeignet für Touch-down PCR und Gradienten-PCR
  • Verbesserte Leistung in Multiplex-PCR-Reaktionen
  • Ideal für automatisierte Flüssigkeitsbearbeitungssysteme

Anwendungen:

  • Touch-down PCR und Gradienten-PCR
  • Multiplex-PCR zur gleichzeitigen Verstärkung mehrerer Ziele
  • Automatisierte PCR-Vorbereitungen mit Flüssigkeitsbearbeitungsrobotern
  • Diagnostische Tests, die eine hohe Spezifität erfordern
  • Forschungsanwendungen mit komplexen oder niedrig abundanten Vorlagen
  • Forensische und klinische Tests, bei denen Spezifität von höchster Bedeutung ist

Unsere Cold-sensitive-Mutant HotStart Taq-DNA-Polymerase bietet einen erheblichen Vorteil in PCR-Anwendungen, indem sie einen sauberen Start des Verstärkungsprozesses gewährleistet. Ihre kontrollierte Aktivierung sichert ein präziseres und effizienteres Ergebnis, was sie zu einem wertvollen Instrument für Labore macht, die ihre PCR-Arbeitsabläufe optimieren möchten.

Beschreibung

CSM Taq Polymerase (Cold sensitive mutant Taq Polymerase) ist eine Art HotStar Polymerase. Sie stammt von dem mutierten E. coli. Im Gegensatz zur monoklonalen Antikörper-basierten Hot-Start-Taq oder chemisch modifizierten Hot-Start-Taq ist Cold Taq die cold-sensitive-Mutant-Taq. Sie behält die Hot-Start-Fähigkeit während der gesamten Verstärkungszyklen.

Kältesensible Mutant Taq-Polymerasen sind für Hot-Start-PCR konzipiert, wirken jedoch nicht bei niedrigen Temperaturen. Sie bieten eine ausgezeichnete Spezifität und eine doppelt so hohe Fehlertoleranz im Vergleich zur Wildtyp-Taq. Sie ist für PCR mit anspruchsvollen Vorlagen wie GC-reichen Fragmenten und Mikrosatelliten konzipiert.

Kältesensible Mutant Taq-Polymerasen eignen sich besonders gut für die Primererweiterung von Single-Nukleotid-Polymorphismen (SNP)-Markern.

Kältesensible Mutant Taq-Polymerasen behalten auch unter Bedingungen, die auf hohe Ausbeute abgestimmt sind, eine ausgezeichnete Spezifität und ein minimales Hintergrundsignal. Tatsächlich kann das Enzym sogar bei genomischen Vorlagen mit MgCl2-Konzentrationen von bis zu 10 mM eingesetzt werden.

Kältesensible Mutant Taq-Polymerasen können schwierige Regionen überbrücken, z. B. Regionen, die inverse tandemschwere Wiederholungen oder eine hohe Sekundärstruktur aufweisen.

Kaltempfindliche mutante Taq-Polymerasen wirken auf eine völlig einzigartige Weise, wobei die Nukleotid-Auswahl an der aktiven Stelle verbessert wird und eine viel geringere Rate von Mismatch-Extension besteht, was bedeutet, dass nur perfekt ausgerichtete Primare verlängert werden. Dadurch kann das Enzym eine noch höhere Spezifität als bei Hot-Start-Techniken (manuell oder automatisch) ohne die Notwendigkeit unbequemer Vor-Inkubationsschritte liefern.

ANWENDUNGEN

  • Warmstart-PCR-Verstärkung
  • Spezifische Verstärkung komplexer cDNA- und genomischer Vorlagen zur Verstärkung schwieriger Vorlagen wie GC-reiche Fragmente und Mikrosatelliten
  • Erweiterung der SNP-Marker
  • Amplifizierung genomischer DNA-Ziele bis zu 10 kb mit hoher Treue, Spezifität und Empfindlichkeit
  • Amplifikation aus einer DNA-Vorlage mit geringer Kopienzahl, Hochleistungs-Hot Start-PCR mit hoher Spezifität, Empfindlichkeit und Ausbeute
  • Routine-diagnostische PCR mit Warmstart, die eine hohe Reproduzierbarkeit erfordert.
  • Echtzeit-PCR
  • Multiplex-PCR
  • Erzeugung von PCR-Produkten für die TA-Kloning

Qualitätskontrolle

  • Funktionale Abwesenheit von doppel- und einsträngiger Endonukleaseaktivität;
  • Reinheit> 99% durch sds-Gel-Elektrophorese;
  • Jeder Charge von CSM Taq DNA Polymerase wird auf Verstärkung mit mindestens 10 ng menschlicher Genom-DNA getestet;
  • eine Woche lang bei Raumtemperatur vollständig aktiv bleiben;
  • Keine DNA-Reste des Wirts.

Reaktionsgemisch eingerichtet

CompoNent Lautstärke Endkonzentration
Vorlage DNA <1 ug nach Bedarf
Vorwärtsprimar (10 μm) 2 μl 0.4 μM
Rückwärtsprimar (10 μm) 5 μl 1x
2.5mM jedes dNTP-Mix 4 μl 200μM jedes
CSM Taq DNA Polymerase, 5U/μl 0.4 μl 2 Einheiten
DHL 2o zum endgültigen Volumen 50 μl nicht anwendbar

Konzentration : 5 E/μl

Lagerung : Aufbewahrung bei -20°C

Verpackung : in großen Mengen

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PC05 csm Taq DNA Polymerase Kältesensible Taq-DNA-Polymerase-Mutanten, 5U/μl

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