Inhibitor Ribonukleázy, RNase inhibitor 40U/ul

rekombinantní lidská placentální inhibitor ribonukleázy, 40U/μl

Zdroj

Šťáva E. coli vyjadřující rekombinantní klon, který nese gen inhibitoru ribonukleázy z lidské placenty.

Koncentrace

40 U/μl.

Definice jednotky

Jedna jednotka je definována jako množství rekombinantního inhibitoru ribonukleázy potřebné k inhibici aktivity 5 ng ribonukleázy A o 50 %.

Aktivita je měřena inhibicí hydrolyzy cytidinu 2’3’-cyclic monofosfátu ribonukleázou A.

Úložný roztok

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v/v) glycerol

úložiště

Uchovávejte při -20°C

Kontrola kvality

Nepřítomnost endonukleázy
1 μg Lambda DNA je inkubován s 200 jednotkami inhibitory ribonukleázy po dobu 16 hodin při 37°C.
Po inkubaci je Lambda DNA viditelná jako nepoškozená na agarásovém gelu obarveném bromidem etidiovým pro ověření nepřítomnosti viditelné endonukleázy.

Nepřítomnost nickázy
1 μg typu I nadvinutého pBR322 je inkubován s 200 jednotkami inhibitory ribonukleázy po dobu 4 hodin při 37°C.
Po inkubaci je nadvinutá DNA vizualizována na agarásovém gelu obarveném bromidem etidiovým pro ověření nepřítomnosti viditelného roztažení nebo řezání.

Nepřítomnost exonukleázy
1 μg Lambda DNA/HindIII Markers je inkubován s 200 jednotkami inhibitory ribonukleázy po dobu 16 hodin při 37°C.
Po inkubaci jsou Lambda DNA/HindIII Markers odděleny pomocí 1% agarásového gelu a obarveny bromidem etidiovým. Markery zůstávají jako nepoškozené pásky bez rozmazání.

Nepřítomnost RNase a latentní RNase
Pro testování přítomnosti aktivity RNase je inkubováno 1 µg RNA s 200 jednotkami Inhibitoru Ribonukleázy po dobu 4 hodin při 37°C.
Po inkubačním období je RNA viditelná jako neporušený pás na agarózovém gelu zakolorovaném bromidem etidiovým, aby se ověřila absence viditelné RNase.
Pro testování přítomnosti latentní aktivity RNase jsou 200 jednotek Inhibitoru Ribonukleázy termálně denaturóvány při 70°C po dobu 15 minut a následně inkubovány s 1 µg RNA po dobu 4 hodin při 37°C.
Po inkubačním období je RNA viditelná jako neporušený pás na agarózovém gelu zakolorovaném bromidem etidiovým, aby se ověřila absence viditelné RNase.

Fyzikální čistota

Čistota je ≥95% podle SDS-polyakrylamidového gelu s barvením Coomassie blue.

Poznámka k použití

Inhibitor Ribonukleázy je aktivní v širokém rozsahu pH (pH 5,5-9). Standardní RT a in vitro transkripce používají Inhibitor Ribonukleázy v konečné koncentraci 1 jednotka/µl.

objednávka