Chladně citlivý mutantní HotStar Taq DNA Polymerase
- Úvod
Úvod
Popis produktu:
Naše studeně citlivá mutanta HotStart taq DNA polymeráza je jedinečná varianta tradiční Taq polymerázy, navržená se studeně citlivou mutací, která zabraňuje aktivitě při pokojové teplotě. Tento inovativní design zajišťuje, že enzym zůstává neaktivní až do počátečního denaturačního kroku PCR, čímž se snižuje nespecifická amplifikace a tvorba primer-dimerů.
Hlavní vlastnosti:
- Mutace citlivá na chlad pro kontrolovanou aktivaci
- Žádná aktivita při místnosti téplotě, minimalizuje neúmyslné amplifykace
- Zvýšená specifita a výnos cílové DNA
- Vhodné pro dotykovou PCR a gradientní PCR
- Vylepšený výkon v multiplexních reakcích PCR
- Ideální pro automatizované systémy manipulace s kapaliny
Aplikace:
- Dotyková PCR a gradientní PCR
- Multiplexní PCR pro současnou amplifykaci více cílů
- Automatizované PCR nastavení pomocí robů pro likvidní manipulaci
- Diagnostické testy vyžadující vysokou specifitu
- Výzkumné aplikace zahrnující komplexní nebo málo přítomné šablony
- Forenzní a klinické testování, kde je specifita rozhodující
Naše Cold sensitive mutant HotStart Taq DNA Polymerase nabízí významnou výhodu v aplikacích PCR tím, že poskytuje čistý start procesu amplifikace. Její kontrolovaná aktivace zajistí více zaměřený a účinnější výsledek, což ji činí cenným prostředkem pro laboratoře, které chtějí optimalizovat své PCR pracovní postupy.
Popis
CSM Taq polymerázy (Cold sensitive mutant Taq polymerázy) je druh HotStar Polymerázy. Pochází z mutovaného E. coli. CSM Taq polymeráza, na rozdíl od hot start Taq založeného na monoclonálních antikorpusech nebo chemicky modifikovaného hot start Taq, je Cold Taq, což je cold sensitive mutant Taq. Udržuje schopnost hot start po celou dobu všech cyklů amplifikace.
Mutantní Taq polymerázy citlivé na chlad jsou navrženy pro Hot Start PCR, nefungují při nízké teplotě. Nabízejí vynikající specifitu a dvakrát vyšší fidelity než divoký typ Taq. Jsou určeny pro PCR s obtížnými šablonami, jako jsou GC-bohaté fragmenty a mikrosatelity.
Mutantní Taq polymerázy citlivé na chlad jsou zvláště vhodné pro extenzi primérů u markerů jednonukleotidových polymorfismů (SNP).
Mutantní Taq polymerázy citlivé na chlad zachovávají vynikající specifitu a minimální pozadí i v podmínkách určených pro vysoký výnos. Ve skutečnosti lze enzym použít dokonce na genomických šablonách s koncentracemi MgCl2+ až 10 mM.
Mutantní Taq polymerázy citlivé na chlad jsou schopny procházet obtížnými oblastmi, například oblastmi, které zahrnují inverzní tandemové opakování a ty s vysokým množstvím sekundární struktury.
Mutanty Taq polymeráz, které jsou citlivé na chlad, fungují zcela jedinečným způsobem, který zahrnuje vylepšený výběr nukleotidů na aktivním místě a mnohem nižší rychlost prodlužování neodpovídajících párování. To znamená, že budou prodlužovány pouze dokonale zarovnané iniciátory. V důsledku toho může enzym poskytovat ještě vyšší specifitu než techniky hot-start (ruční nebo automatické) bez potřeby nepohodlných předinkubačních kroků.
Aplikace
- Amplifikace PCR s hot start
- Specifická amplifikace složitého cDNA a genomické šablony pro amplifikaci obtížných šablon, jako jsou úlomky bohaté na GC a mikrosatelity
- Prodlužování iniciátorů SNP markerů
- Amplifikace cílových sekvencí genomické DNA až do délky 10 kb s vysokou věrností, specifitou a citlivostí
- Amplifikace ze šablony DNA s nízkým počtem kopii, vysokoprůchodná PCR s hot start s vysokou specifitou, citlivostí a výstupem
- Rutinní diagnostická PCR s hot start vyžadující vysokou reprodukovatelnost.
- Real-Time PCR
- Multiplexní PCR
- Vytváření PCR produktů pro TA klonovalci
Kontrola kvality
- Funkční absence činnosti dvojprahového a jednoprahového endonukleázu;
- Čistota >99% testem pomocí SDS elektroforeze;
- Každá dávka enzymu CSM Taq DNA Polymerase je testována na amplifikaci z minimálně 10 ng lidské genomické DNA;
- Udržuje plnou aktivitu při pokojové teplotě po týdnu;
- Žádný reziduální hostitelské DNA.
Nastavení reakčního míšce
Komponent | Objem | Konečná koncentrace |
Šablona | DNA <1 ug | podle potřeby |
Vedoucí primer (10 μM) | 2 μl | 0,4 μM |
Obrácený primer (10 μM) | 5 μl | 1x |
2,5 mM každého dNTPmixu | 4 μl | 200 μM každého |
CSM Taq DNA polymerasa, 5U/μl | 0,4 μl | 2 jednotky |
ddH 2K tomu konečný objem | 50μl | Nepoužitelné |
Koncentrace : 5 u/μl
úložiště : Uchovávejte při -20°C
Balení : Bulk
objednávka
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | Chladně citlivý mutant Taq DNA Polymeras, 5U/μl |