ролята и приложенията на m-mlv обратна транскриптаза в молекулярната биология
Емхина е била централна в различни биохимични реакции във връзка с динамичната област на молекулярната биология.m-mlv обратна транскриптаза(m-mlv rt), който е един от тези ензими, напоследък е получил голямо внимание, тъй като е способен да синтезира CDNA от RNA шаблони. Този ензим, който се получава от вируса на левкемията на мишките (Moloney murine leukemia virus, m-mlv r
структурата и функцията на m-mlv обратна транскриптаза
m-mlv обратна транскриптаза функционира като ДНК-зависима ДНК полимераза с както рНК-зависима ДНК полимераза, така и рибонуклеаза h (рназа h) дейности. Тя разпознава шаблони на РНК и извършва синтез на вериги на CDNA, като използва dntps
Приложения на m-mlv обратна транскриптаза
CDNA синтез: методите на обратна транскрипция, използващи m-mlv rt, са често използвани процедури за преобразуване на съдържанието на РНК в CDNA. За проучвания надолу по веригата, включително количествена ПКР, анализ на генната експресия или изграждане на библиотека на CDNA
Клониране на гени: чрез използване на m-mlv rt, изследователите могат да клонират специфични гени от техните проби на РНК. Следователно, конкретни гени могат да бъдат изолирани и усилвани, така че да могат да бъдат допълнително анализирани по отношение на функцията.
Анализ на експресията: съществена стъпка в всяка техника за анализ на експресията, като например QPCR или анализ на микромасиви, включва синтезиране на CDNA, опосредован от ензима чрез неговата рназа h активност. По този начин учените получават възможност да разберат как гените се изразяват
Функционална геномика: в функционалната геномика m-mlv rt се използва за подготовка на библиотеки CDNA от сложни популации на RNA. Тези библиотеки след това се скринират за гени със специфични функции или фенотипи, като по този начин се разкриват нови познания за функцията и взаимо
предимства и съображения
m-mlv обратната транскриптаза има няколко предимства като висока ефективност, специфичност и репродуктивност. Въпреки това, трябва да се отбележи, че ензимът работи добре при специфични условия като оптимална температура, pH стойности, както и концентрация на сол. Понякога по време на синтеза на CDNA се наблю
В заключение, m-mlv обратна транскриптаза е полезен инструмент в изследванията по молекулярна биология за синтезиране на CDNA от RNA шаблони за различни приложения. Клонирането на гени, анализът на експресията и изследванията по функционална геномика разчитат силно на m-