Рибонуклеаза Инhibитор, RNase инхибитор 40Е μл

рекомбинантен човешки плацентарен инхабитор на рибонуклеаза, 40U/μl

Източник

Штам Е. coli, изразяващ рекомбинантен клон, носещ гена на инхибитора на рибонуклеазата от плодородната тъкан.

Концентрация

40 U/μl.

Дефиниция на единица

Една единица е дефинирана като количеството Рекомбинантен Инхибитор на Рибонуклеаза необходимо за да инхибира дейността на 5 нг рибонуклеаза A с 50%.

Дейността се измерва чрез инхибирането на хидролизата на цитидин 2’3’-циклично монофосфат от рибонуклеаза A.

Буфер за съхранение

20мM HEPES-KOH(PH7.6), 50мM KCl, 8мM DTT, 50%(v/v) глицерол

Съхранение

Съхранявайте при -20°C

Контрол на качеството

Отсъствието на ендонуклеаза
1μg от DNA на Ламбда се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 16 часа при 37°C.
След инкубацията, DNA на Ламбда се визуализира като непокварено на агарозов гел, ок rencontен с бромов етидиум, за да се потвърди отсъствието на видими Ендонуклеази.

Отсъствие на Никейз
1μg от тип I суперспирално pBR322 се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубацията, суперспиралното DNA се визуализира на агарозов гел, ок<tool_call>ентен с бромов етидиум, за да се потвърди отсъствието на видими рези или разцепявания.

Отсъствие на Екзонуклеаза
1μg от DNA на Ламбда/HindIII Маркери се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 16 часа при 37°C.
След инкубацията, DNA на Ламбда/HindIII Маркери се отделя чрез 1% агарозов гел и се окрашва с бромов етидиум. Маркерите остават като непокварени полоски без размазване.

Отсъствие на RNase и латентна RNase
За тестиране на присъствието на активност на RNase, 1μg от RNA се инкубира с 200 единици Рибонуклеазен Инhibитор в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубацията, РНК се визуализира като цяла полоска на агарозов гел, оцветен с брометид етидиум, за да се потвърди отсъствието на видима РНаза.
За тестване на присъствието на латентна активност на РНаза, 200 единици от Инhibитор на Рибонуклеаза се термично денатурират при 70°C в продължителност 15 минути и се инкубират с 1 мкг от РНК в продължителност 4 часа при 37°C.
След инкубацията, РНК се визуализира като цяла полоска на агарозов гел, оцветен с брометид етидиум, за да се потвърди отсъствието на видима РНаза.

Физическа чистота

Чистотата е ≥95%, както се judge-ва по SDS-полиакриламиден гел с оцветяване с Кoomassie blue.

Забележка за употреба

Инhibиторът на Рибонуклеаза е активен в широк диапазон на pH (pH5.5-9). Стандартното РТ и in vitro транскрипция използват Инhibитор на Рибонуклеаза при крайна концентрация от 1u/ул.

поръчка