инхибитор на рибонуклеазата, инхибитор на рназата

рекомбинантен инхибитор на рибонуклеазата на плацентата, 40 u/μl

източник

щам на E. coli, който изразява рекомбинантен клон, който носи ген за инхибитор на рибонуклеазата от човешката плацента.

концентрация

40 u/μl.

Определение на единица

една единица се определя като необходимото количество рекомбинантен инхибитор на рибонуклеазата, който инхибира активността на 5ng рибонуклеаза а с 50%.

активността се измерва чрез инхибиране на хидролизата на цитидин 23- цикличен монофосфат от рибонуклеаза а.

буфер за съхранение

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) глицерол

съхранение

съхраняват при -20°C

контрол на качеството

липса на ендонуклеаза
1 μg от Ламбда ДНК се инкубира с 200 единици инхибитор на рибонуклеазата в продължение на 16 часа при 37°C.
След инкубация, ламбда ДНК се визуализира като непокътната върху гела от агароза, боядисан с етидиев бромид, за да се провери липсата на видима ендонуклеаза.

липса на никаза
1 μg от тип I суперкоулиран pbr322 се инкубира с 200 единици инхибитор на рибонуклеазата в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубация, свръхвитаната ДНК се визуализира върху гела от агароза, боядисан с етидиев бромид, за да се провери липсата на видими нарязвания или нарязвания.

липса на екзонуклеаза
1 μg от маркерите на Ламбда ДНК/индии се инкубира с 200 единици инхибитор на рибонуклеазата в продължение на 16 часа при 37°C.
След инкубация маркерите на Ламбда ДНК/Индии се отделят с 1% гел на агароза и се оцветяват с етидиев бромид. Маркерите остават непокътнати като ленти без размазване.

липса на рназа и латентна рназа
за изследване на наличието на рназова активност 1 гр рна се инкубира с 200 единици инхибитор на рибонуклеазата в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубация РНК се визуализира като непокътната лента върху гела от агароза, боядисан с етидиев бромид, за да се провери липсата на видима рНКаза.
За да се изследва наличието на латентна рназа, 200 единици инхибитор на рибонуклеазата се денутрират на температура 70°C в продължение на 15 минути и инкубират с 1 уг рна в продължение на 4 часа при 37°C.
След инкубация РНК се визуализира като непокътната лента върху гела от агароза, боядисан с етидиев бромид, за да се провери липсата на видима рНКаза.

физическа чистота

чистотата е ≥95% според sds-полякриламид гела с синьо оцветяване.

бележка за употреба

стандартната рт и in vitro транскрипция използва инхибитор на рибонуклеазата при крайна концентрация от 1 u/ ul.

Ред