Молекулярно-биологични ензими - каталози за открития и иновации
В молекулярната биология ензимите играят централна роля, като катализират важни биохимични реакции, които са фундаментални за изучаването и манипулирането на генетични материали. В тази статия ще разгледаме различни ензими за молекулярна биология и техния значителен принос към научното развитие.
ДНК полимерази
ДНК полимеразите са ключови ензими в ДНК репликацията, ремонта и усилването. Taq Полимераза както и полимерази с висока точност, такива като Pfu и Phusion, промениха ПЦР-я поради неговата топлина устойчивост, която позволява точно усилване на ДНК последователности. Освен това, способността за коригиране е присъства у ДНК полимерази като Pwo и Deep Vent.
Ограничващи ендонуклеази
Рестрикционните ендонуклеази или рестрикционни ензими са неоценими инструменти за манипулиране на ДНК. Този клас функционира чрез разбиване на нитките на ДНК в специфични позиции, което облеснява клонирането на гени, мапинга или анализите. Високата прецизност на рестрикционните ензими, например EcoRI, BamHI и HindIII, позволява изсичането на специфични фрагменти от дадена молекула ДНК с последващо лигериране.
Обратна транскриптаза
Тези видове ензими, обратна транскриптаза, позволяват синтеза на комплементарна дезоксирибонуклеинова киселина (cDNA) от рибонуклеинови шаблони, който е ключов стъпка при анализирането на геново изразяване и клонирането на еукариотични гени. Например, изследванията в транскриптомиката или молекулярната генетика са значително повлияни от използването на обратна транскриптаза като M-MLV или Superscript.
Лигази
Например, T4 DNA лигаза може да се използва като обичайен начин за свързване на две часта от ДНК заедно, което е много полезно по време на конструирането на рекомбинантни плазмиди и експериментите по редакция на гени, докато Quick Ligase е друг ензим, често използван заедно с нея, за да затваря треските, направени в плазмидите по време на клонинговите реакции, тъй като той има 5’ фосфатазна активност (Purified Ligases, 2009).
Ензими за Полимеразна Ланцова Реакция (ПЛР)
PCR включва използването на няколко ензима, като ДНК полимерази, реверзни транскриптази и ДНК лигази, за да се усилят и манипулират ДНК последователности. Развитието на taq ДНК полимераза и други нови полимерази с висока точност, като KAPA HiFi или Q5, разшири обхвата на приложение на PCR от диагностика до подготовка на библиотеки за секвениране от следващо поколение.
Критични събития като усилване на нуклеинови киселини, редакция на гени и репликация на ДНК се провеждат от ензими в молекулярната биология. С продължаващото иновиране и инженеризиране на ензими с подобрени свойства, въздействието на тези молекулни инструменти ще се увеличава, стимулирайки нови открития и трансформативни технологии в животните науки.