Yüksək saf ribonukleaz inhibitoru həlli - RNase inhibitoru 40U/μl, cDNA sintezi və molekulyar biologiya tətbiqlərində RNT qorunması üçün optimal

Məhsul Təsviri

Yüksək Saf Ribonukleaz İnhibitoru Həlli təqdim edirik, premium keyfiyyətli reaktiv təqdim edən rnase inhibitoru ultra-konsentrat 40 Birim/μl ilə. Bu həll, müxtəlif molekulyar biologiya prosedurlarında RNA-nın idarə olunması zamanı ribonukleazlardan maksimum qoruma təmin etmək üçün xüsusi olaraq hazırlanmışdır.

Əsas Xüsusiyyətlər

• Əla Sıfət: Ribonükleaz İnhibitörü rekombinant şəkildə istehsal olunub və səhih sıfət təmin etmək üçün çətin şərtlərdə təzələnib, eksperimentlərinizə daxil olmayan nəticələr təmin edilir.

• Ultra-Qonşuluq Formula: 40U/μl qonşuluqda təqdim edilən bu İnhibitör, həddindən çox tələb edilən tətbiqlərdə effektiv istifadə üçün uyğunlaşdırılır, burada hətta iz miqdarıdakı RNase ləğv nəticələri pozitiv etki apara bilər.

• Geniş Spektr Aktivlik: İnhibitör A, B, C və digər endo- və eksoribonükleazların geniş spektrini effektiv şəkildə nötrallaşdırır, RNA nümunələrinizin bozulmasını məhdudlaşdırır.

• Sabit və Faal: Mükhtəlif temperatur və pH şərtlərində sabitlik üçün formulasiya edilmiş, inhibitor saxlama zamanı və müxtəlif eksperimental protokollarda faal qalır.

• Uyğunluq: Avtomatlaşdırılmış sistemlərlə və əllə hazırlanan reaksiyalarda istifadə üçün idealdir, cDNA sintezi və nükleik asid manipulyasiya texnikalarında ümumiyyətlə istifadə olunan buflar və enzimlərlə tamamilə uyğundur.

Tətbiqlər

• cDNA Sintez: Ters transkriptsiya reaksiyası zamanı RNase sirlənməsini dayandırmaq üçün əsaslıdır, bu da sintetik cDNA-nın verimi və tamlığını yaxşılaşdırır.

• RNA Ayrılmazlığı və Purifikasiyası: RNA ayrılma setlərinin və purifikasiya iş proseslərində əsas hissəsidir, izolasiya əvvəl və sonra RNA tamlığını Saxlamaq üçün.

• Şimal Blotting: Membranlar üzərində RNase faliyyətini dayandıraraq RNA-nın yüksək keyfiyyətli transferi və hibridizasiyasını təmin edir.

• qPCR və RT-qPCR: Kvantitativ PCR və ters transkriptsiya kvantitativ PCR assay-lərində RNA şablonlarını koruyur, həssaslıq və spesifikağı artırır.

• RNA-Protein Interaksiyası İdarəetməsi: Ko-immunoprecipitasiya (RIP) və digər RNA-protein interaksiyası eksperimentləri zamanı RNA molekullarını saxlayır.

mənbə

İnsan plasentasından Ribonükleaz İnhibitörü genini bərpa edən E. coli ştraynı ifadə edir.

Konsentratsiya

40 U/μl.

Vahid Təyinatı

Bir vahid, ribonükleaz A-nın aktivliyini 5 ng-ə qarşı 50%-də dayandırmalı olan Rekombinant Ribonükleaz İnhibitorun miqdarı kimi təyin olunur.

Aktivlik, ribonükleaz A tərəfindən citidin 2'3'-siklik monofosfatının hidrolizinin dayandırılması yolu ilə ölçülür.

Saxlama Bufferi

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(h/h) glicerol

yaddaş

-20°C-də saxlayın

Keyfiyyət nəzarəti

Endonükleaz yoğdur

1μg Lambda DNA, 200 unit Ribonuclease İnhibitörü ilə 37°C temperaturada 16 saat inkubasiya edilir.

Inkubasiya sonunda, Lambda DNA, etidium brom-stikiulişli agaroz gelində tam olaraq görünürlüyünə əsasən, görən Endonuklezinin yoxluğunu təsdiqləmək üçün nəzarət edilir.

Nickase-nin yoxluğu

1μg Tip I süperdövri pBR322, 200 unit Ribonuclease İnhibitörü ilə 37°C temperaturada 4 saat inkubasiya edilir.

Inkubasiya sonunda, süperdövri DNA, görünür nicklər və ya kesimlərin yoxluğunu təsdiqləmək üçün, etidium brom-stikiulişli agaroz gelində nəzarət edilir.

Exonuclease-nin yoxluğu

1μg Lambda DNA/HindIII Markərləri, 200 unit Ribonuclease İnhibitörü ilə 37°C temperaturada 16 saat inkubasiya edilir.

Inkubasiya sonunda, Lambda DNA/HindIII Markərləri, 1% agaroz gella ayırılır və etidium bromu ilə stikiulişdirilir. Markərlər smearing olmadan tam band kimi qalır.

RNase və latenti RNase-nin yoxluğu

RNase aktivitəsinin mövcudluğunu sinəmək üçün, 1ug RNA, 200 unit Ribonuclease İnhibitörü ilə 37°C temperaturada 4 saat inkubasiya edilir.

İnkubasiya sonunda, görünür RNase-nin olmamasını təsdiq etmək üçün RNA, etidium bromid ilə doldurulmuş agaroz gel-də tam band kimi göstərilir.

Latenti RNase aktivitəsinin varlığına görə 200 unit Ribonükleaz İnhibitörü 70°C temperaturdakı 15 dəqiqəlik istifadə ilə termik dənətirilir və 1ug RNA ilə 37°C temperaturdakı 4 saat boyu inkubasiya edilir.

İnkubasiya sonunda, görünür RNase-nin olmamasını təsdiq etmək üçün RNA, etidium bromid ilə doldurulmuş agaroz gel-də tam band kimi göstərilir.

Fiziki Çişmiyyət

Coomassie mavi steyndən sonra SDS-poliakrilamid gelləri ilə qiymətləndirildikdə, çişmiyyət ≥95%-dir.

İstifadə Qeydi

Ribonükleaz İnhibitörü geniş bir pH diapazonunda (pH5.5-9) fəaliyyət göstərir. Standart RT və in vitro transkripsiyada Ribonükleaz İnhibitörü nihayi kontraksiyada 1u/ul olaraq istifadə olunur.