إنزيم Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، حساس للحرارة
- مقدمة
مقدمة
Uracil-DNA Glycosylase، E.coli، 1 وحدة/μل
الوصف
إنزيم Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، الحساس للحرارة هو بروتين مستنسخ في E. coli، ينبع من البكتيريا البحرية. يقوم الإنزيم بهydrolyzing الروابط الغليكوسيدية للأوراسيل في DNA المفرد والمزدوج السلاسل، مما يؤدي إلى استئصال الأوراسيل وإنشاء مواقع حساسة قلوياً في DNA. لا يكون الإنزيم نشطاً على RNA وDNA الأصلي الخالي من الأوراسيل. بما أن Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، الحساس للحرارة لا يحتاج إلى أيونات معدنية، فإنه يكون نشطاً تماماً حتى في وجود EDTA.
يمكن استخدام إنزيم Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، الحساس للحرارة مع dUTP للتخلص من التلوثات الناتجة عن تفاعل الـ PCR السابق. لجعل منتجات الـ PCR عرضة للتدهور، يجب استبدال dTTP بـ dUTP في خليط تفاعل الـ PCR. يجب معالجة خلطات تفاعل الـ PCR اللاحقة مسبقًا بالإنزيم Uracil-DNA Glycosylase (UNG)، الحساس للحرارة قبل إجراء الـ PCR لتدمير الحمض النووي الذي يحتوي على اليوراسيل. لا يحتوي الحمض النووي الأصلي على اليوراسيل، لذلك العينة لا تتعرض للتدهور بهذه العملية.
المصدر: E. coli المُعاد تركيبه
التركيز والحجم: 1 وحدة/μL
تعريف الوحدة
تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية إنزيم Uracil-DNA Glycosylase (UNG) اللازمة لتدمير 1μg من الحمض النووي الأحادي السلاسل الذي يحتوي على اليوراسيل تمامًا عند درجة حرارة 37°C خلال 60 دقيقة.
محلول التخزين
20mM Tris-HCl (pH8.0)، 0.1mM EDTA، 100mM KCl، 1mM DTT، 0.5%(v/v) Tween-20، 0.5%(v/v) NP-40، 50%(v/v) الجлицيرول.
التحكم في الجودة
النقاء >99% بواسطة SDS PAGE
لا يوجد تلوث من إندونوكلياز، نيكاز، إكسونوكلياز أو إنزيم RNase.
إبطال النشاط الحراري
50°C لمدة 2 دقيقة
درجة حرارة التفاعل
20~37°C لـ 10 دقائق.
كمية الاستخدام
0.1~1U من إنزيمات UNG لكل تفاعل 50 ميكروليتر.
الشحن والتخزين
يُخزن عند -20°C، ويُشحن مع جل ثلجي.
طلب
UG01 | إوراسيل-إن-غليكوزيلاز (UNG) | Uracil-DNA Glycosylase، E.coli، 1 وحدة/μل |
UG02 | إيروسينيل-إن-غليكوسيلاز، حساس للحرارة | إوراسيل-دي إن إيه غليكوزيلاز، حساس للحرارة، 1U/μl |