دور وتطبيقات ملف الترنسكتراز العكسي في علم الأحياء الجزيئية

كانت الإنزيمات محورية في تفاعلات كيميائية حيوية مختلفة فيما يتعلق بالجسم الحيوي الجزيئيم-ملف الترنسكتراز العكسي(m-mlv rt) ، وهو أحد هذه الإنزيمات، وقد حظي مؤخرا باهتمام كبير لأنه قادر على توليف CDNA من قوالب RNA. هذا الإنزيم الذي يتم الحصول عليه من فيروس سرطان الدم الفأر Moloney (m-mlv) ، يجد استخدامًا واسعًا في استنساخ

بنية ووظيفة ملف

تعمل transcriptase العكسية m-mlv ك polymerase DNA معتمدة على DNA مع نشاطات DNA polymerase rna معتمدة على DNA و ribonuclease h (rnase h). إنها تتعرف على قوالب rna وتقوم بتوليف سلاسل cdna باستخدام dntps كترابط.

تطبيقات ترنسكتراز عكسية m-mlv

اختلاط الـ CDNA: طرق النسخ العكسي التي تستخدم m-mlv rt هي إجراءات شائعة تستخدم لتحويل محتويات الـ RNA إلى CDNAS. للدراسات التالية بما في ذلك PCR الكمي أو تحليل التعبير الجيني أو بناء مكتبة CDNA ، هذه التق

استنساخ الجينات: باستخدام m-mlv rt، يمكن للباحثين استنساخ جينات محددة من عينات الحمض النووي الريبوزي. وبالتالي، يمكن عزل الجينات المحددة وتضخيمها حتى يتم تحليلها بشكل أكبر من حيث الوظيفة.

تحليل التعبير: خطوة أساسية في أي تقنيات تحليل التعبير مثل تحليل qpcr أو تحليل المصفوفات الصغيرة تنطوي على توليف CDNAS التي يوسطها الإنزيم من خلال نشاط rnase h. من خلال هذه الطرق يحصل العلماء على فرصة لمعرفة كيفية الت

علم الجينوم الوظيفي: في علم الجينوم الوظيفي، يستخدم m-mlv rt لإعداد مكتبات CDNA من مجموعات RNA معقدة. ثم يتم فحص هذه المكتبات للبحث عن الجينات ذات الوظائف أو الأنماط الظاهرية المحددة وبالتالي الكشف عن رؤى

المزايا والاعتبارات

يحتوي ترنسكتراز m-mlv العكسي على العديد من المزايا مثل الكفاءة العالية والخصوصية والإعادة الإنتاجية. ومع ذلك، يجب ملاحظة أن الإنزيم يعمل بشكل جيد في ظل ظروف محددة مثل درجة الحرارة المثلى وقيم PH وكذلك تركيز الملح. في بعض

في الختام، يعدّ م-ملف الترنسكتراز العكسي أداة مفيدة في أبحاث علم الأحياء الجزيئية لتوليف CDNA من قوالب RNA لتطبيقات مختلفة. تعتمد استنساخ الجينات وتحليل التعبير ودراسات الجينوم الوظيف