Cold sensitive mutant hotstar Taq DNA Polymerase
- المقدمة
المقدمة
وصف المنتج:
إن إنزيم بوليميراز الحمض النووي Taq HotStart المتحور الحساس للبرودة تق DNA polymerase هو نوع فريد من بوليميراز Taq التقليدي، تم تصميمه بطفرة حساسة للبرودة تمنع النشاط في درجة حرارة الغرفة. يضمن هذا التصميم المبتكر أن يبقى الإنزيم غير نشط حتى خطوة الت denaturation الأولية في PCR، مما يقلل من التضخيم غير المحدد وتكوين ديمر البرايمر.
الميزات الرئيسية:
- الطفرة الحساسة للبرودة لتفعيل متحكم به
- لا نشاط عند درجة حرارة الغرفة، مما يقلل من التضخيم غير المحدد
- زيادة في دقة وكمية الحمض النووي المستهدف
- مناسب لـ PCR بالنزول والPCR التدرجي
- تحسين الأداء في تفاعلات PCR المتعددة
- مثالي لأنظمة التعامل الآلي السائل
التطبيقات:
- PCR بالنزول والPCR التدرجي
- PCR متعدد لتضخيم أهداف متعددة بشكل متزامن
- إعدادات PCR الآلية باستخدام روبوتات معالجة السوائل
- اختبارات التشخيص التي تتطلب مستوى عالٍ من الدقة
- تطبيقات البحث التي تشمل قوالب معقدة أو ذات تركيز منخفض
- الفحص الجنائي والسريري حيث تكون الدقة هي الأهم
يقدم بوليميراز Taq DNA الخاص بنا المُحسَّن بجين متحور حساس للبرودة ميزة كبيرة في تطبيقات PCR من خلال توفير بداية نظيفة لعملية التضخيم. يضمن تفعيله الخاضع للرقابة نتيجة أكثر استهدافًا وكفاءة، مما يجعله أصلًا قيّمًا للمختبرات الراغبة في تحسين عملياتها الخاصة بـ PCR.
وصف
إن إنزيم البوليميراز CSM Taq (بوليميراز Taq المُتحور الحساس للبرودة) هو نوع من البوليميراز HotStar. مصدره هو E. coli المتحور. على عكس البوليميراز Taq ذو البداية الساخنة المستند إلى الأجسام المضادة الأحادية أو البوليميراز Taq ذو البداية الساخنة المعدل كيميائيًا، فإن Cold Taq هو نوع من البوليميراز Taq المُتحور الحساس للبرودة. يحتفظ بالقدرة على البدء الساخن طوال دورة التضخيم.
إن إنزيمات البوليميراز تاقي الحساسة للبرودة مصممة لاستخدامها في تفاعل التضخيم المتسلسل عند درجة حرارة مرتفعة، ولا تعمل عند درجات الحرارة المنخفضة. توفر هذه الإنزيمات دقة ممتازة ودقة أعلى بمقدار الضعف مقارنة بالتاقي البري. وهي مصممة لاستخدامها في تفاعل التضخيم المتسلسل مع قوالب صعبة مثل الشظايا الغنية بـ GC والميكروسايتيلات.
إن إنزيمات البوليميراز تاقي الحساسة للبرودة مناسبة بشكل خاص لتمديد الأوليغونوكليوتيدات لعلامات البوليمرorfism النووي الواحد (SNP).
تحافظ إنزيمات البوليميراز تاقي الحساسة للبرودة على دقة ممتازة ومستوى خلفية منخفض حتى في الظروف المُصممة لتحقيق إنتاجية عالية. في الواقع، حتى باستخدام القوالب الجينومية، يمكن استخدام الإنزيم مع تركيزات MgCl2 تصل إلى 10 mM.
تستطيع إنزيمات البوليميراز تاقي الحساسة للبرودة تمديد السلاسل عبر المناطق الصعبة، مثل المناطق التي تحتوي على تكرارات عكسية متتالية أو تلك التي تحتوي على كميات كبيرة من الهياكل الثانوية.
تعمل إنزيمات البوليميراز تاقي المعدلة حساسية البرودة بطريقة فريدة تمامًا، تتضمن تحسين اختيار النوكليوتيدات في الموقع النشط، وانخفاض كبير في معدل توسيع التوافق الخاطئ، مما يعني أن فقط المقاطع الأولية المنسقة بشكل مثالي سيتم توسيعها. وبالتالي، يمكن للإنزيم أن يعطي دقة أعلى حتى من تقنيات البدء الساخن (يدوية أو تلقائية) دون الحاجة إلى خطوات ما قبل الحضانة غير المريحة.
التطبيقات
- تكبير PCR بدء ساخن
- تكبير خاص لقوالب cDNA والجينوم المعقدة، لتكبير القوالب الصعبة مثل الشظايا الغنية بـ GC والميكروسايتيلات
- توسيع الماركرات SNP
- تكبير الأهداف الجينومية DNA حتى 10 كيلو باس بدرجة عالية من الدقة والتحديد والحساسية
- التكبير من قوالب DNA ذات عدد نسخ منخفض، PCR بدء ساخن عالي الإنتاجية مع تحديد وحساسية وإنتاجية عالية
- الفحص الروتيني باستخدام PCR بدء ساخن الذي يتطلب تكرارية عالية.
- PCR الزمني الحقيقي
- PCR المتعدد
- إنتاج منتجات PCR لاستنساخ TA
التحكم في الجودة
- غياب وظيفي لأنشطة إنزيمات النهايات المزدوجة والفردية;
- نقاء > 99٪ اختبار بواسطة كهروسباية جل SDS;
- يُختبر كل دفعة من إنزيم CSM Taq DNA Polymerase لضمان التضخيم باستخدام ما يصل إلى 10 نانوجرام من الحمض النووي الجينومي البشري؛
- تحافظ على النشاط الكامل لمدة أسبوع عند درجة حرارة الغرفة;
- لا تحتوي على آثار الحمض النووي المضيف.
إعداد خليط التفاعل
مكون | الحجم | التركيز النهائي |
القالب | DNA <1 ميكروجرام | حسب الحاجة |
المركب الأمامي (10 μM) | 2 μl | 0.4 μM |
المركب العكسي (10 μM) | 5 μl | 1x |
مزيج dNTPmix بمعدل 2.5 mM لكل واحد | 4 μl | 200μM لكل منها |
CSM Taq DNA polymerase، 5U/μl | 0.4 μl | وحدة واحدة |
ddH 2O إلى الحجم النهائي | 50μl | غير قابل للتطبيق |
التركيز : 5 وحدة/ميكروليتر
تخزين : يُحفظ عند -20°C
التعبئة : بالجملة
طلب
PC05 | csm Taq DNA Polymerase | المتحولات الحساسة للبرودة من Taq DNA Polymerases، 5U/μl |