die rol en toepassings van m-mlv omgekeerde transkriptase in molekulêre biologie

Ensieme was sentraal in verskeie biochemiese reaksies in verband met die altyd dinamiese veld van molekulêre biologie.m-mlv omgekeerde transkriptase(m-mlv rt), wat een van hierdie ensieme is, het onlangs baie aandag gekry omdat dit in staat is om CDNA uit RNA-sjabloon te sintetiseer. Hierdie ensiem wat verkry word uit Moloney muine leukemievirus (m-mlv), vind 'n uitgebreide gebruik in genkloning, uitdrukking analise en funksion

die struktuur en funksie van m-mlv omgekeerde transkriptase

m-mlv omgekeerde transkriptase funksies as 'n DNA-afhanklike DNA-polimeras met beide rna-afhanklike DNA-polimeras en ribonuklease h (rnase h) aktiwiteite. Dit herken RNA-sjablone en voer sintese van CDNA-stringe uit met behulp

Aansoeke van m-mlv omgekeerde transkriptase

CDNA sintese: omgekeerde transkripsie metodes met behulp van m-mlv rt is algemene prosedures wat gebruik word vir die transformasie van RNA inhoud in CDNA's. Vir stroomafwaarde studies insluitend kwantitatiewe PCR, gen-ekspressie analise of die bou van 'n CDNA biblioteek is hierdie teg

genkloning: Deur m-mlv rt te gebruik, kan navorsers spesifieke gene uit hul RNA-monsters kloneer. Gevolglik kan spesifieke gene geïsoleer en versterk word sodat hulle verder in terme van funksie ontleed kan word.

uitdrukking analise: 'n noodsaaklike stap in enige uitdrukking analise tegnieke soos qpcr of mikroarray analise behels die sintese van CDNA's bemiddel deur die ensiem deur middel van sy rnase h aktiwiteit. Deur middel van hierdie maniere wetenskaplikes kry die geleentheid om uit te vind hoe gene hulself anders uit

funksionele genomiese: in funksionele genomiese word m-mlv rt gebruik om CDNA-biblioteke van komplekse RNA-populasies voor te berei. Hierdie biblioteke word dan geskandeer vir gene met spesifieke funksies of fenotipes en sodoende nuwe insigte oor die genfunksie en interaksie openbaar.

voordele en oorwegings

m-mlv omgekeerde transkriptase het verskeie voordele soos hoë doeltreffendheid, spesifisiteit en reproduseerbaarheid. Daar moet egter op gelet word dat die ensiem goed funksioneer onder spesifieke toestande soos optimale temperatuur, ph-waardes sowel as soutkonsentrasie. Soms tydens CDNA sintese is daar afbreek van '

Om af te sluit, is m-mlv omgekeerde transkriptase 'n nuttige instrument in molekulêre biologie-navorsing om CDNA uit RNA-sjablone vir verskillende toepassings te sintetiseer. Genkloning, uitdrukkingsanalise en funksionele genomiese studies maak grootliks staat op m-mlv rt aangesien