Ribonuclease Inhibitor, RNase inhibiteur 40U ul

recombinante menslike plasenta Ribonuclease Inhibitor, 40U/μl

Bron

E. coli stam wat 'n rekombinante kloon druk wat die Ribonuclease Inhibitor gen van menslike plasenta dra.

konsentrasie

40 U/μl.

Eenhede Definisie

Een eenheid word gedefinieer as die hoeveelheid Herstelde Ribonuclease Inhibitor wat vereis word om die aktiwiteit van 5ng van ribonuclease A deur 50% te inhibeer.

Aktiwiteit word gemeet deur die inhibisie van hidrolise van cytidien 2'3'-sikliese monofosfaat deur ribonuclease A.

Opslagbuffer

20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v/v) glyserol

Berging

Bewaar by -20°C

Kwaliteitsbeheer

Afwezigheid van Endonuclease
1μg van Lambda DNA word met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 16 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná die inkubering word die Lambda DNA as ongeskonde op 'n etidium bromiüm-gekolourde agarose gels visualiseer om die afwesigheid van sigbare Endonuclease te bevestig.

Afwezigheid van Nickase
1μg van Tipe I oorspronklike pBR322 word met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 4 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná die inkubering word die oorspronklike DNA op 'n etidium bromiüm-gekolourde agarose gels visualiseer om die afwesigheid van sigbare nikkings of snydinge te bevestig.

Afwezigheid van Exonuclease
1μg van Lambda DNA/HindIII Markers word met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 16 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná die inkubering word Lambda DNA/HindIII Markers deur 'n 1% agarose gel geskei en met etidium bromiüm gekleur. Markers bly as ongeskonde bande sonder smearing.

Afwees van RNase en latente RNase
Om die teenwoordigheid van RNase-aktiwiteit te toets, word 1ug RNA met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 4 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná inkbearing word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidium bromiide-verfde agarose-gel gesien om die afwesigheid van sigbare RNase te bevestig.
Om die teenwoordigheid van latente RNase-aktiwiteit te toets, word 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor by 70°C vir 15 minute hittegedenatureer en met 1ug RNA vir 4 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná inkbearing word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidium bromiide-verfde agarose-gel gesien om die afwesigheid van sigbare RNase te bevestig.

Fisieke Reinheid

Die reinheid is ≥95% soos deur 'n SDS-polikrysimaatgel met Coomassie blou verf bepaal.

Gebruiksoorwegings

Ribonuclease Inhibitor is aktief oor 'n wyd pH-bereik (pH5.5-9). Die standaard RT en in vitro transkripsie gebruik Ribonuclease Inhibitor by 'n finale konentrasie van 1u/ul.

Bestelling