Ribonuklease inhibeerder, rnase inhibeerder 40u ul

Rekombinant menslike plasenta ribonuklease remmer, 40u/μl

bron

e. coli stam wat 'n rekombinante kloon uitdruk wat 'n ribonuklease remmer-geen van menslike plasenta dra.

konsentrasie

40 eenhede/μl.

eenheid definisie

Een eenheid word gedefinieer as die hoeveelheid rekombinante ribonuklease remmer wat benodig word om die aktiwiteit van 5ng ribonuklease a met 50% te rem.

aktiwiteit word gemeet deur die remming van hidrolise van sitidien 23-sikliese monofosfaat deur ribonuklease a.

berging buffer

20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) gliserol

berging

by -20°c bewaar

kwaliteitsbeheer

afwesigheid van endonuklease
1μg lambda-DNA word vir 16 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word lambda-DNA as ongeskonde op 'n etidiumbromide-besmette agarose-gel gevisualiseer om die afwesigheid van sigbare endonuklease te verifieer.

afwesigheid van nikkel
1μg tipe i supergewapende pbr322 word vir 4 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word die supergewapende DNA op 'n agarose gel met etidiumbromide geïllustreer gevisualiseer om te verifieer of daar geen sigbare sny of sny is nie.

afwesigheid van eksonuklease
1μg lambda dna/hindiii-markers word vir 16 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word lambda-DNA/hindiii-markerings met 1% agarose gel geskei en met etidiumbromide gekleur.

afwesigheid van rnase en latente rnase
Om te toets vir die teenwoordigheid van rnase-aktiwiteit, word 1 ug rna vir 4 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidiumbromide-besmette agarose gel gevisualiseer om die afwesigheid van sigbare rnase te verifieer.
Om te toets vir die teenwoordigheid van latente rnase aktiwiteit, word 200 eenhede ribonuklease remmer vir 15 minute by 70°C hitte-denatureer en vir 4 uur by 37°C met 1ug rna gebêre.
Na inkubasie word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidiumbromide-besmette agarose gel gevisualiseer om die afwesigheid van sigbare rnase te verifieer.

fisiese suiwerheid

Die suiwerheid is ≥95% volgens sds-polyacrylamide gel met coomassie blou kleur.

gebruik nota

Die standaard rt en in vitro transkripsie gebruik ribonuklease remmer by 'n finale konsentrasie van 1 u/ul.

orde