Hoogs suiwer ribonuklease remmer oplossing - RNase remmer 40U/μl, optimaal vir RNA beskerming in cDNA sintese en molekulêre biologie aansoeke
- Inleiding
Inleiding
Produkbeskrywing
Stel ons Hoogste Puur Ribonuklease Inhibitor Oplossing voor, 'n premium kwaliteit reagens wat RNase Inhibitor bevat rnaseremmers by 'n ultra-gekoncentreerde 40 Eenhede/μl. Hierdie oplossing is spesifiek ontwerp om maksimum beskerming te bied teen ribonukleases tydens RNA hantering in verskeie molekulêre biologie prosedures.
belangrike kenmerke
Uitsonderlike Reinheid: Die Ribonuclease Inhibitor word rekombinant geproduseer en streng gereinig om 'n hoë mate van reinheid te verseker, wat verseker dat daar geen interferensie met jou eksperimente sal wees nie.
Ultra-Konserde Formule: Gelewer by 'n konsentrasie van 40U/μl, laat hierdie inhibiteur effektiewe gebruik toe in eisende toepassings waar self spoorhoeveelhede van RNase resultate kan kompromitteer.
Breë Spektrum Aktiwiteit: Die inhibiteur neutraliseer suksesvol 'n wye verskeidenheid RNases A, B, C, en ander endo- en exoribonukleasies, wat jou RNA-steekproewe beskerm teen degradasie.
Stabiel en aktief: Geformuleer vir stabiliteit oor 'n reeks temperatuur- en pH-toestande, bly die inhibiteur aktief tydens berging en deurheen verskeie eksperimentele protokolle.
Kompatibiliteit: Ideaal vir gebruik met outomatisierte stelsels en handmatig voorbereide reaksies, dit is volkome kompatibel met buffere en ensieme wat algemeen in cDNA-sintese en nukleïne-acid manipulasie-tegnieke gebruik word.
Toepassingsareas
cDNA-sintese: Wesentlik vir die voorkoming van RNase-verontreiniging tydens omgekeerde transkripsie-reaksies, wat die opbrengs en integriteit van gesintetiseerde cDNA verbeter.
RNA-isolering en verfynings: Wesenlike komponent in RNA-ekstraksiekits en verfyningswerkstrome om RNA-integriteit te handhaaf voor en na isolering.
Noordelike bloeikartografie: Verseker hoë-kwaliteits RNA-oormatiging en hibridisasie deur RNase-aktiwiteit te inhibeer wat RNA op membrane kan degrader.
qPCR en RT-qPCR: Beskerm RNA-sjablone in kwantitatiewe PCR en omgekeerde transkripsie-kwantitatiewe PCR-toetse, wat sensitiwiteit en spesifisiteit verbeter.
RNA-Proteïen Interaksie Studies: Bewaar RNA-molekuul tydens gemeenskappelijke immunoprecipitasie (RIP) en ander RNA-proteïen interaksie eksperimente.
Bron
E. coli stam wat 'n rekombinante kloon druk wat die Ribonuclease Inhibitor gen van menslike plasenta dra.
konsentrasie
40 U/μl.
Eenhede Definisie
Een eenheid word gedefinieer as die hoeveelheid Herstelde Ribonuclease Inhibitor wat vereis word om die aktiwiteit van 5ng van ribonuclease A deur 50% te inhibeer.
Aktiwiteit word gemeet deur die inhibisie van hidrolise van cytidien 2'3'-sikliese monofosfaat deur ribonuclease A.
Opslagbuffer
20mM HEPES-KOH(PH7.6), 50mM KCl, 8mM DTT, 50%(v/v) glyserol
Berging
Bewaar by -20°C
Kwaliteitsbeheer
Afwezigheid van Endonuclease
1μg van Lambda DNA word met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 16 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná die inkubering word die Lambda DNA as ongeskonde op 'n etidium bromiüm-gekolourde agarose gels visualiseer om die afwesigheid van sigbare Endonuclease te bevestig.
Afwezigheid van Nickase
1μg van Tipe I oorspronklike pBR322 word met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 4 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná die inkubering word die oorspronklike DNA op 'n etidium bromiüm-gekolourde agarose gels visualiseer om die afwesigheid van sigbare nikkings of snydinge te bevestig.
Afwezigheid van Exonuclease
1μg van Lambda DNA/HindIII Markers word met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 16 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná die inkubering word Lambda DNA/HindIII Markers deur 'n 1% agarose gel geskei en met etidium bromiüm gekleur. Markers bly as ongeskonde bande sonder smearing.
Afwees van RNase en latente RNase
Om die teenwoordigheid van RNase-aktiwiteit te toets, word 1ug RNA met 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor vir 4 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná inkbearing word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidium bromiide-verfde agarose-gel gesien om die afwesigheid van sigbare RNase te bevestig.
Om die teenwoordigheid van latente RNase-aktiwiteit te toets, word 200 eenhede van Ribonuclease Inhibitor by 70°C vir 15 minute hittegedenatureer en met 1ug RNA vir 4 ure by 37°C geïnkubeer.
Ná inkbearing word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidium bromiide-verfde agarose-gel gesien om die afwesigheid van sigbare RNase te bevestig.
Fisieke Reinheid
Die reinheid is ≥95% soos deur 'n SDS-polikrysimaatgel met Coomassie blou verf bepaal.
Gebruiksoorwegings
Ribonuclease Inhibitor is aktief oor 'n wyd pH-bereik (pH5.5-9). Die standaard RT en in vitro transkripsie gebruik Ribonuclease Inhibitor by 'n finale konentrasie van 1u/ul.