Hoogs suiwer ribonuklease remmer oplossing - rnase remmer 40u/μl, optimaal vir rna beskerming in cdna sintese en molekulêre biologie aansoeke
- inleiding
inleiding
Produkbeskrywing
Stel ons Hoogste Puur Ribonuklease Inhibitor Oplossing voor, 'n premium kwaliteit reagens wat RNase Inhibitor bevatrnaseremmersby 'n ultra-gekoncentreerde 40 Eenhede/μl. Hierdie oplossing is spesifiek ontwerp om maksimum beskerming te bied teen ribonukleases tydens RNA hantering in verskeie molekulêre biologie prosedures.
belangrike kenmerke
uitsonderlike suiwerheid: die ribonuklease-remmer word rekombinant vervaardig en streng gesuiwer om 'n hoë suiwerheid te verseker, wat verseker dat u eksperimente nie inmeng nie.
ultra-geconcentreerde formule: voorsien teen 'n konsentrasie van 40 u/μl, hierdie remmer maak dit moontlik om doeltreffend gebruik te word in veeleisende toepassings waar selfs spore van rnase die resultate kan in gevaar stel.
breëspektrumaktiwiteit: die remmer neutraliseer effektief 'n wye verskeidenheid RNA's a, b, c en ander endo- en eksoribonuklease, wat jou RNA-monsters beskerm teen afbreek.
stabiel en aktief: Die remmer bly aktief gedurende berging en gedurende verskeie eksperimentele protokolle.
verenigbaarheid: ideaal vir gebruik met outomatiese stelsels en handgereed reaksies, dit is ten volle verenigbaar met buffers en ensieme wat algemeen gebruik word in CDNA sintese en nukleïensuur manipulasie tegnieke.
aansoeke
CDNA sintese: noodsaaklik vir die voorkoming van rnase besmetting tydens omgekeerde transkripsie reaksies, wat die opbrengs en integriteit van gesintetiseerde CDNA verbeter.
RNA-isolasie en suiwering: noodsaaklike komponent in RNA-ekstraksie-stelle en suiweringswerkvloei om RNA-integriteit voor en na isolasie te handhaaf.
noordelike blotting: verseker hoë kwaliteit RNA-oordrag en hibridisering deur rnaase-aktiwiteit te inhibeer wat RNA op membrane kan afbreek.
qpcr en rt-qpcr: beskerm RNA-sjabloon in kwantitatiewe pcr en omgekeerde transkripsie kwantitatiewe pcr-toetse, wat sensitiwiteit en spesifisiteit verhoog.
RNA-proteïen interaksies studies: bewaar RNA molekules tydens co-immunoprecipitasie (rip) en ander RNA-proteïen interaksies eksperimente.
bron
e. coli stam wat 'n rekombinante kloon uitdruk wat 'n ribonuklease remmer-geen van menslike plasenta dra.
konsentrasie
40 eenhede/μl.
eenheid definisie
Een eenheid word gedefinieer as die hoeveelheid rekombinante ribonuklease remmer wat benodig word om die aktiwiteit van 5ng ribonuklease a met 50% te rem.
aktiwiteit word gemeet deur die remming van hidrolise van sitidien 23-sikliese monofosfaat deur ribonuklease a.
berging buffer
20 mm hepes-koh ((ph7.6), 50 mm kcl, 8 mm dtt, 50% ((v/v) gliserol
berging
by -20°c bewaar
kwaliteitsbeheer
afwesigheid van endonuklease
1μg lambda-DNA word vir 16 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word lambda-DNA as ongeskonde op 'n etidiumbromide-besmette agarose-gel gevisualiseer om die afwesigheid van sigbare endonuklease te verifieer.
afwesigheid van nikkel
1μg tipe i supergewapende pbr322 word vir 4 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word die supergewapende DNA op 'n agarose gel met etidiumbromide geïllustreer gevisualiseer om te verifieer of daar geen sigbare sny of sny is nie.
afwesigheid van eksonuklease
1μg lambda dna/hindiii-markers word vir 16 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word lambda-DNA/hindiii-markerings met 1% agarose gel geskei en met etidiumbromide gekleur.
afwesigheid van rnase en latente rnase
Om te toets vir die teenwoordigheid van rnase-aktiwiteit, word 1 ug rna vir 4 uur by 37°c met 200 eenhede ribonuklease-remmer gebêre.
Na inkubasie word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidiumbromide-besmette agarose gel gevisualiseer om die afwesigheid van sigbare rnase te verifieer.
Om te toets vir die teenwoordigheid van latente rnase aktiwiteit, word 200 eenhede ribonuklease remmer vir 15 minute by 70°C hitte-denatureer en vir 4 uur by 37°C met 1ug rna gebêre.
Na inkubasie word die RNA as 'n ongeskonde band op 'n etidiumbromide-besmette agarose gel gevisualiseer om die afwesigheid van sigbare rnase te verifieer.
fisiese suiwerheid
Die suiwerheid is ≥95% volgens sds-polyacrylamide gel met coomassie blou kleur.
gebruik nota
Die standaard rt en in vitro transkripsie gebruik ribonuklease remmer by 'n finale konsentrasie van 1 u/ul.